Anti-Heparanase 1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9Y251

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Heparanase-Funktion und -Lokalisierung

• Heparanase (HPSE, auch bekannt als HPA1, HPR1, HSE1, HPSE1) ist eine Endo-β-Glucuronidase, die spezifisch Heparansulfat-Proteoglykane (HSPGs) in kleinere Fragmente spaltet und eine Schlüsselrolle beim Abbau und der Umgestaltung der extrazellulären Matrix (ECM) spielt.
• Das Enzym zeigt eine pH-abhängige Aktivität, ist bei neutralem pH-Wert im Wesentlichen inaktiv, aber unter sauren Bedingungen, wie sie bei Tumorinvasion, Entzündungen und Wundheilung auftreten, hochaktiv.
• Heparanase wird zunächst als 65 kDa Vorläufer synthetisiert, der proteolytisch zu einem reifen, aktiven Heterodimer verarbeitet wird, das aus 8 kDa und 50 kDa Untereinheiten besteht; das reife Enzym lokalisiert hauptsächlich in Lysosomen und kann sezerniert werden.
• Subzelluläre Fraktionierungs- und Immunhistochemie-Studien zeigen Heparanase an der Lysosomenmembran, im Zellkern und als sezerniertes Protein, was auf vielseitige Rollen sowohl in intrazellulären als auch extrazellulären Mikroumgebungen hindeutet.
• Die Gewebeexpression ist in der Plazenta und Milz prominent, mit geringeren Mengen in Lymphknoten, Thymus, peripheren Blutleukozyten, Knochenmark, Endothelzellen, fetaler Leber und verschiedenen Tumorgeweben; in Haarfollikeln wird es spezifisch in den inneren Wurzelscheiden-Schichten nachgewiesen.
• Über seine enzymatische Funktion hinaus moduliert Heparanase die Zelladhäsion, fördert die AKT1/PKB-Phosphorylierung über Lipid Rafts, reguliert die VEGF-vermittelte Angiogenese durch SRC-Aktivierung hoch und wirkt als Prokoagulans durch Verstärkung der Faktor X-Aktivierung.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (Aminosäuren 36–275) entspricht einer Region, die wahrscheinlich das N-terminale Signalpeptid ausschließt und möglicherweise die reife Form von Heparanase anvisiert; erwägen Sie, die Reaktivität mit sowohl der Pro-Form (~65 kDa) als auch den prozessierten Untereinheiten (50 kDa und 8 kDa) unter Ihren Assay-Bedingungen zu überprüfen.
• Für Western Blotting bereiten Sie Lysate bei neutralem pH-Wert vor und ziehen Sie in Betracht, eine positive Kontrolle aus Plazenta- oder Milzgewebe, wo die HPSE-Expression hoch ist, mitzuführen; ein Band nahe 61–65 kDa ist zu erwarten.
• Testen Sie in der Immunhistochemie (IHC-P) und Immunfluoreszenz (IF/ICC) den Antikörper an Paraffin-eingebetteten oder gefrorenen Schnitten von Plazenta, Milz oder Tumor-Xenotransplantaten, die Heparanase stark exprimieren, und schließen Sie eine Isotypenkontrolle ein.
• Für ELISA-Anwendungen verwenden Sie ihn als Capture- oder Detektionsantikörper, nachdem Sie die Paarungskompatibilität bestätigt haben; rekombinantes Heparanase-Protein (z. B. das Immunogen) kann als Standard dienen.

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