Anti-HDAC4 polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P56524

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von HDAC4

• HDAC4 ist eine Histondeacetylase der Klasse IIa, die die Transkription unterdrückt, indem sie Acetylgruppen von den N-terminalen Lysinresten der Kernhistone (H2A, H2B, H3, H4) entfernt und dadurch die Chromatinkondensation fördert.
• Über seine N-terminale Erweiterung interagiert HDAC4 mit den MEF2-Transkriptionsfaktoren (MEF2A, MEF2C, MEF2D) und reguliert die Muskeldifferenzierung und -hypertrophie.
• Bei Brustkrebs ist HDAC4 an der MTA1-vermittelten epigenetischen Stilllegung von ESR1 beteiligt und trägt zur Resistenz gegen Hormontherapien bei.
• HDAC4 deacetyliert HSPA1A und HSPA1B an Lysin 77, verstärkt deren Interaktion mit dem Co-Chaperon STUB1 und beeinflusst dadurch die Prote Qualitätskontrolle. Zugehörige Referenzen: PMID:27708256
• HDAC4 pendelt zwischen Zellkern und Zytoplasma; die Phosphorylierung durch Kinasen wie CaMK fördert die Bindung an 14-3-3 und die zytoplasmatische Retention, während Sumoylierung und Ubiquitinierung seine Stabilität und Lokalisation regulieren.
• Das Enzym ist zinkabhängig und besitzt eine konservierte katalytische Domäne, die Zn²⁺ koordiniert; Mutationen, die die Metallbindung stören, beeinträchtigen die Aktivität.
• Alternatives Spleißen von HDAC4 erzeugt Isoformen mit unterschiedlicher gewebespezifischer Expression und regulatorischen Funktionen.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen umfasst die Aminosäurereste 451–650, die innerhalb der konservierten Deacetylase-Domäne liegen; diese Region ist bei Mensch, Maus und Ratte zu >95 % identisch, was die breite Kreuzreaktivität erklärt.
• Beim Western Blot (WB) wird eine Bande bei etwa 119 kDa erwartet; verwenden Sie kernangereicherte Lysate (z. B. HeLa, C2C12) und validieren Sie die Ergebnisse mit geeigneten positiven und negativen Kontrollen.
• Bei der Immunhistochemie (IHC-P) müssen die Bedingungen für die Antigenrückgewinnung (z. B. Citratpuffer pH 6,0) und die Verdünnung des Primärantikörpers optimiert werden; abhängig vom Gewebe und Krankheitszustand sind sowohl nukleäre als auch zytoplasmatische Färbemuster möglich.
• Für ELISA kann der Antikörper als Fang- oder Nachweisreagenz verwendet werden; für Sandwich-Assays wird die Kombination mit einem validierten HDAC4-Nachweisantikörper empfohlen.
• Die polyklonale Natur ermöglicht eine robuste Signalverstärkung, jedoch sollte für quantitative Anwendungen die Chargenkonsistenz überprüft werden.

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