Anti-HDAC3 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O15379

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: HDAC3-Funktion und -Lokalisierung

• HDAC3 ist eine Histondeacetylase der Klasse I, die die Deacetylierung von Lysinresten an den N-terminalen Enden der Kernhistone (H2A, H2B, H3, H4) katalysiert, was zu einer kondensierten Chromatinstruktur und einer epigenetischen Transkriptionsrepression führt.
  Verwandte Referenzen: PMID:21030595, PMID:23911289
• Es fungiert als Teil von multiproteinen Repressorkomplexen wie N-Cor und wird von Transkriptionsfaktoren wie BCL6 rekrutiert, um H3K27 an Enhancer-Elementen zu deacetylieren und die Aktivität von EP300 zu antagonisieren.
  Verwandte Referenzen: PMID:23911289, PMID:22230954
• Neben Histonen deacetyliert HDAC3 eine Reihe von nicht-histon Substraten, einschließlich RARA, STAT3, MAPK14 und MEF2D, und beeinflusst Wege von Entzündungen bis zum Zellüberleben.
  Verwandte Referenzen: PMID:15653507, PMID:21030595, PMID:21444723, PMID:28167758
• HDAC3 wirkt auch als Protein-Lysin-Deacylase, die nicht-acetyloyl Acyl-Modifikationen wie Crotonyl (Decrotonylierung), Lactyl (Delactylierung) und 2-Hydroxyisobutyryl-Gruppen entfernt, mit Substraten wie MAPRE1/EB1 und NBN/NBS1.
  Verwandte Referenzen: PMID:28497810, PMID:29192674, PMID:34608293, PMID:38961290
• In der zirkadianen Uhr hat HDAC3 deacetylase-unabhängige Rollen: Es fördert die Ubiquitinierung von BMAL1 und stabilisiert CRY-Proteine und reguliert so die zirkadiane Genexpression und den hepatischen Lipidstoffwechsel.
• Subzellulär ist HDAC3 überwiegend nukleär und chromosomenassoziiert, wird aber auch im Zytoplasma nachgewiesen, was im Einklang mit seinen Shuttle-Funktionen steht.
• HDAC3 ist in Geweben weit verbreitet exprimiert, ist ein Phosphoprotein mit alternatives Spleißen und mehreren Interaktionspartnern, was seiner Beteiligung an vielfältigen biologischen Prozessen zugrunde liegt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (aa 299–428) zielt auf den C-terminalen Bereich von menschlichem HDAC3 ab, der in Maus und Ratte konserviert ist (wie durch Daten zur Kreuzreaktivität angezeigt); überprüfen Sie die Kreuzreaktivität in Ihrem spezifischen Modellsystem.
• Im Western Blot hat HDAC3 ein vorhergesagtes Molekulargewicht von ~49 kDa; verwenden Sie geeignete Proteinstandards und bestätigen Sie die Bandspezifität mit siRNA-Knockdown oder KO-Zelllysaten, falls verfügbar.
• Für IHC-P können Antigen-Retrieval-Methoden (z. B. Citratpuffer pH 6,0, wärmeinduziert) erforderlich sein; testen Sie eine Reihe von Antikörperverdünnungen (z. B. 1:50–1:200) an Kontrollgeweben.
• Für IF/ICC fixieren Sie die Zellen mit 4% PFA und permeabilisieren Sie mit 0,1% Triton X-100; eine nukleäre Lokalisierung sollte beobachtet werden; fügen Sie Kontrollen mit nur Sekundärantikörper hinzu.
• Für ELISA kann der Antikörper in direkten oder indirekten Formaten verwendet werden; titrieren Sie gegen rekombinantes HDAC3-Protein, um optimale Beschichtungs- und Detektionskonzentrationen zu ermitteln.
• Lagern Sie den Antikörper aliquotiert bei -20°C; vermeiden Sie wiederholte Gefrier-Auftau-Zyklen, um die Leistungsfähigkeit zu erhalten.

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