Anti-HCRT Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - O43612

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: HCRT-Funktion und -Lokalisierung

• HCRT kodiert den Vorläufer der Orexin-Neuropeptide, auch bekannt als Hypocretin, der an der Regulation des Fütterungsverhaltens und der Schlaf-Wach-Zyklen beteiligt ist.
• Der Prepro-Orexin-Vorläufer wird proteolytisch verarbeitet, um zwei aktive Neuropeptide zu produzieren: Orexin-A und Orexin-B, die mit hoher Affinität an ihre jeweiligen Rezeptoren HCRTR1 und HCRTR2 binden.
• Die Orexin-Signalübertragung ist an breiteren homöostatischen Funktionen beteiligt, einschließlich Energiestoffwechsel, autonomer Regulation, Hormonhaushalt und Flüssigkeitshomöostase.
• HCRT wird hauptsächlich im Nucleus subthalamicus exprimiert, mit nicht nachweisbaren Spiegeln in anderen untersuchten Hirnregionen und peripheren Geweben (Herz, Plazenta, Lunge, Leber, Skelettmuskel, Niere, Bauchspeicheldrüse).
• Subzellulär lokalisiert der Vorläufer im rauen endoplasmatischen Retikulum und wird über zytoplasmatische Vesikel an synaptischen Endigungen sezerniert.
• Wichtige posttranslationale Modifikationen umfassen Amidierung, Disulfidbindungsbildung und N-terminale Pyroglutaminsäurebildung, die für die Neuropeptidaktivität entscheidend sind.
• Klinisch ist eine HCRT-Dysfunktion mit Krankheitsvarianten verbunden, die mit Narkolepsie und anderen Schlafstörungen in Verbindung stehen (UniProt-Schlüsselwort: Krankheitsvariante).

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für den Western-Blot-Nachweis beachten Sie das vorhergesagte Molekulargewicht von 13 kDa; validieren Sie den Antikörper in Ihrem Proben-System unter Verwendung geeigneter positiver Kontrollen aus Hirngewebe (Nucleus subthalamicus) oder rekombinantem Protein.
• Aufgrund der eingeschränkten HCRT-Expression sollte eine Probenanreicherung aus dem Zentralnervensystem sichergestellt werden; Gewebe aus Herz, Plazenta, Leber oder Niere kann basierend auf berichteten nicht nachweisbaren Spiegeln als negative Kontrolle dienen.
• Bei ELISA-Anwendungen kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz eingesetzt werden; optimieren Sie die Beschichtungskonzentration und Blockierbedingungen empirisch.
• Eine Kreuzreaktivität mit Maus- und Ratten-Orthologen wurde berichtet; es wird jedoch empfohlen, einen Sequenzabgleich der Immunogenregion über die Spezies hinweg durchzuführen, um die Spezifität zu bestätigen.
• Erwägen Sie Präabsorptions- oder Peptidkompetitions-Assays, um die Spezifität zu bestätigen, wenn unspezifische Banden im Western Blot auftreten.

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