Anti-HCoV-OC43 Spike S2 Kaninchen-Polyclonal-Antikörper für WB, ELISA - P36334

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung des Spike-Glykoproteins

• Das Spike-Glykoprotein (S), auch E2 oder Peplomerprotein genannt, ist ein virales Fusionsprotein der Klasse I, das die Oberfläche von HCoV-OC43-Virionen bedeckt.
• Die S1-Untereinheit vermittelt die anfängliche Bindung an Wirtszellen durch Bindung an sialinsäurehaltige Rezeptoren, ein entscheidender Faktor für das virale Tropismus.
• Nach der Rezeptorbindung und Endozytose des Virus durchläuft die S2-Untereinheit dramatische Konformationsänderungen; ihre Heptad-Wiederholungsregionen bilden ein Trimer aus Haarnadeln, das die Fusion von viraler und wirtseigener endosomaler Membran antreibt.
• Spike wird als Vorläufer synthetisiert und proteolytisch in S1 und S2 gespalten; das interne Fusionspeptid innerhalb von S2 wird nach der Spaltung freigelegt, was die Membranfusion ermöglicht.
• Während der viralen Assemblierung lokalisiert das Protein an der Virionsmembran, der Wirtszellmembran und der Membran des Zwischenkompartiments zwischen Endoplasmatischem Retikulum und Golgi-Apparat (ERGIC).
• Posttranslationale Modifikationen umfassen N-verknüpfte Glykosylierung, Disulfidbindungen zur Stabilisierung der Präfusionsstruktur und Palmitoylierung zur Verankerung des Proteins in der Lipiddoppelschicht.
• Als wichtiger Virulenzfaktor, der sowohl die Bindung an Wirtszellen als auch den Eintritt vermittelt, ist Spike ein Hauptziel für neutralisierende Antikörper und die Entwicklung diagnostischer Reagenzien.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogenpeptid liegt innerhalb der S2-Untereinheit (AS 782–881); daher wird erwartet, dass der Antikörper sowohl das vollständige Spike (~150 kDa) als auch das S2-Spaltprodukt unter reduzierenden Bedingungen erkennt.
• Verwenden Sie für WB HCoV-OC43-infizierten Zelllysat als Positivkontrolle; Glykosylierung kann dazu führen, dass die Bande bei einem höheren scheinbaren Molekulargewicht wandert.
• Aufgrund der polyclonalen Natur kann der Antikörper eine breite Epitopabdeckung im ELISA bieten; Kreuzreaktivität mit anderen Coronaviren sollte jedoch empirisch überprüft werden.
• Als transmembranes Glykoprotein erfordert Spike geeignete Detergenzien zur Extraktion; vermeiden Sie längeres Kochen von Proben, um Aggregation zu verhindern.

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