Anti-HCoV-NL63 Spike S2 polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q6Q1S2

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung des Spike-Glykoproteins

• Das Spike-Glykoprotein (S-Protein, E2, Peplomer-Protein) ist das Haupt-Hüllprotein von HCoV-NL63 und vermittelt den Viruseintritt in Wirtszellen.
• Die S1-Untereinheit bindet an den Wirtsrezeptor Angiotensin-konvertierendes Enzym 2 (ACE2), um die Infektion zu initiieren. Verwandte Referenzen: PMID:15897467 PMID:19901337 PMID:29142129
• Die S2-Untereinheit ist ein Klasse-I-Virus-Fusionsprotein, das dramatische Konformationsänderungen durchläuft, um Virus- und Wirtsmembranen zu fusionieren.
• Das Protein durchläuft mindestens drei Zustände: native Prä-Fusion, Prä-Haarnadel-Intermediat und Post-Fusion-Haarnadel, wobei coiled-coil Heptad-Repeats eine Trimer-of-Hairpins-Struktur bilden.
• Befindet sich auf der Virion-Membran und in Membranen des endoplasmatischen Retikulums-Golgi-Zwischenkompartiments des Wirts.
• Enthält Disulfidbindungen und ist stark glykosyliert, typisch für virale Hüllproteine, und fungiert bei der Virusbindung und dem -eintritt.
• Wird auch als an Virulenz und Wirt-Virus-Interaktion beteiligt aufgeführt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Da es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt, der gegen ein Peptid-Immunogen in der S2-Region erzeugt wurde, kann er sowohl natives als auch denaturiertes Spike-Protein erkennen; durch Pilotexperimente verifizieren.
• Für Western Blot unter reduzierenden Bedingungen ist ein Band bei etwa 150 kDa zu erwarten; geeignete Molekulargewichtsmarker mitlaufen lassen.
• Für ELISA-Anwendungen in Betracht ziehen, als Beschichtungs- oder Detektionsantikörper in Kombination mit einem geeigneten Sekundärantikörper zu verwenden; mit HCoV-NL63-Antigen validieren.
• Da Kreuzreaktivität nur mit HCoV-NL63 angegeben ist, nicht ohne experimentelle Bestätigung von der Detektion anderer Coronaviren ausgehen.

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