Anti-HCoV-HKU1 Spike S2 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q5MQD0

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung des Spike-Glykoproteins

• Das Spike-Glykoprotein (S-Protein) von HCoV-HKU1, auch bekannt als E2 oder Peplomer-Protein, ist eine wichtige strukturelle Komponente der viralen Hülle und existiert als Homotrimer auf der Oberfläche des Virions.
• Es vermittelt die Anheftung des Virus an Wirtszellen durch Interaktion mit dem Wirtsrezeptor und leitet den Infektionsprozess ein.
• Das S-Protein ist ein virales Fusionsprotein der Klasse I, das die Fusion zwischen der viralen und der Wirtszellmembran durch eine Reihe von Konformationsänderungen antreibt, einschließlich der Bildung einer Trimer-von-Haarnadeln-Struktur in der S2-Untereinheit.
• Nach der viralen Endozytose wirkt die S2-Untereinheit als Fusionspeptid, das nach proteolytischer Spaltung freigelegt wird, um den Eintritt des Virus in das Wirtszytoplasma zu erleichtern.
• Zur subzellulären Lokalisierung gehören die Virionmembran, die Membran des intermediären Kompartiments zwischen endoplasmatischem Retikulum und Golgi-Apparat der Wirtszelle sowie die Wirtszellmembran, was den Synthese- und Transportweg widerspiegelt.
• Das Protein ist stark glykosyliert und palmitoyliert und enthält Disulfidbrücken, Coiled-Coil-Regionen und eine transmembrane Helix, die für seine Stabilität und Fusionsaktivität entscheidend sind.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid aus dem S2-Bereich (Aa 800-900), das in HCoV-HKU1 konserviert ist; überprüfen Sie die Spezifität in relevanten Virusstämmen oder infizierten Zelllysaten.
• Für den Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ~152 kDa; erwägen Sie die Verwendung eines SDS-PAGE-Gels mit niedrigem Prozentsatz und einen Nassblot auf Nitrocellulosemembran für eine optimale Detektion dieses großen Proteins.
• ELISA-Anwendungen können von der Optimierung der Konzentration des Beschichtungsantigens und der Verwendung eines Blockierungspuffers profitieren, der für virale Antigene geeignet ist, um den Hintergrund zu minimieren.
• Eine Kreuzreaktivität wird für HCoV-HKU1 berichtet; wenn Sie andere Coronaviren testen, validieren Sie die Kreuzreaktivität experimentell, da die Sequenzhomologie variieren kann.

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