Anti-HCoV-229E Spike S1 Monoklonaler Antikörper für WB, ELISA – P15423

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation des Spike-Glykoproteins

• Das Spike-(S)-Glykoprotein des humanen Coronavirus 229E (HCoV-229E) ist ein virales Fusionsprotein der Klasse I, das für den Eintritt des Virus in Wirtszellen essenziell ist.
• Es wird als Vorläuferprotein synthetisiert und proteolytisch in die S1- und S2-Untereinheiten gespalten. Die S1-Region enthält die Rezeptorbindedomäne (RBD), die an den Wirtsrezeptor Aminopeptidase N (ANPEP) bindet.
• Die Bindung an den Rezeptor löst konformelle Umlagerungen aus, die das S2-Fusionspeptid freilegen und die Membranfusion zwischen der Virushülle und der Wirtszellmembran einleiten.
• Die S2-Untereinheit weist Heptad-Wiederholungsregionen auf, die sich zu einer charakteristischen Trimer-of-Hairpins-Struktur zusammenlagern, was die Annäherung und Fusion der viralen und der Zielmembran antreibt.
• Subzellulär lokalisiert sich das Spike-Protein während der Viruszusammenbildung an der Virionmembran und im intermediate Kompartiment zwischen Endoplasmatischem Retikulum und Golgi-Apparat (ERGIC) des Wirts.
• Zu den wichtigsten funktionellen und strukturellen Merkmalen gehören ein Signalpeptid, eine Transmembranhelix, Coiled-Coil-Domänen, ausgedehnte Glykosylierung sowie Beteiligungen an Virulenz, Wirt-Virus-Interaktion und viraler Bindung.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Für die Western Blot-Analyse empfehlen sich reduzierende Bedingungen; das Volllängen-Spike-Protein wandert bei etwa 129 kDa, während das S1-Spaltprodukt als kleinere Bande erscheinen kann. Validieren Sie die Antikörperreaktivität in HCoV-229E-infizierten Zelllysaten oder Spike-exprimierenden Zellen.
• In ELISA-Anwendungen kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz für das HCoV-229E Spike S1-Protein verwendet werden; titrieren Sie die Arbeitskonzentration, um das Signal-Rausch-Verhältnis zu optimieren.
• Der Antikörper ist spezifisch für HCoV-229E und zeigt keine Kreuzreaktivität mit phylogenetisch unterschiedlichen menschlichen Coronaviren; bestätigen Sie bei Bedarf die Selektivität in Multipathogen-Panels.

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