Anti-HCFC1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - P51610

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: HCFC1-Funktion und -Lokalisierung

• HCFC1 ist ein transkriptioneller Koregulator, der als Gerüstprotein dient und Interaktionen zwischen Transkriptionsfaktoren wie THAP11 und ZNF143 und Koregulatoren vermittelt (PubMed:26416877). Verwandte Referenzen: PMID:26416877
• Es ist entscheidend für den Zellzyklusfortschritt, mit funktionellen Rollen im G1/S-Übergang, unterstützt durch Studien mit Mutanten und Knockdown-Modellen (PubMed:10629049, PubMed:10779346, PubMed:15190068). Verwandte Referenzen: PMID:10629049 PMID:10779346 PMID:15190068
• HCFC1 verankert die Set1/Ash2-Histon-H3K4-Methyltransferase- und Sin3-Histondeacetylase-Komplexe und integriert so transkriptionelle Aktivierung und Repression (PubMed:12670868). Verwandte Referenzen: PMID:12670868
• Es fungiert als Koaktivator für EGR2 und GABP2 und reprimiert die ZBTB17-vermittelte Aktivierung des p15(INK4b)-Promotors, indem es die Rekrutierung von p300 hemmt (PubMed:12244100, PubMed:14532282). Verwandte Referenzen: PMID:12244100 PMID:14532282
• Als Teil des NSL-Komplexes trägt HCFC1 wahrscheinlich zur nukleosomalen Histon-H4-Acetylierung an spezifischen Lysinresten bei (PubMed:20018852). Verwandte Referenzen: PMID:20018852
• HCFC1 rekrutiert KMT2E/MLL5 an E2F1-responsive Promotoren, fördert die transkriptionelle Aktivierung und erleichtert den Übergang von der G1- zur S-Phase (PubMed:23629655). Verwandte Referenzen: PMID:23629655
• Die subzelluläre Lokalisierung umfasst sowohl das Zytoplasma als auch den Zellkern, was mit seinen vielfältigen regulatorischen Rollen übereinstimmt.
• Das Protein ist weit verbreitet exprimiert, mit besonders hohen Spiegeln in fötalem Gewebe und adulten Nieren, und ist an Wirt-Virus-Interaktionen beteiligt, insbesondere mit Herpes-simplex-Virus VP16.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den N-terminalen 250 Aminosäuren von humanem HCFC1. Bei Verwendung dieses polyklonalen Antikörpers kann die Erkennung mehrerer Epitope ein robustes Signal liefern, jedoch sollte die Chargen-zu-Charge-Konsistenz für kritische Assays bestätigt werden.
• Für Western Blotting beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ~209 kDa. Verwenden Sie ein SDS-PAGE-Gel mit niedrigem Prozentsatz (z. B. 6-8%) und stellen Sie einen effizienten Transfer über Nass-Tank-Blotting mit verlängerter Transferzeit sicher. Die Verwendung eines Hochmolekulargewichts-Markers wird empfohlen.
• Aufgrund des hohen Molekulargewichts sollten frische Proteinlysate mit Proteaseinhibitoren verwendet werden, um einen Abbau zu verhindern, und die Expression in Ihrem Zielgewebe überprüft werden; Nieren- und fötale Gewebelysate können als positive Kontrollen dienen.
• Der Antikörper zeigt laut Herstellerangaben Kreuzreaktivität mit Maus- und Rattenproben. Es wird jedoch empfohlen, eine Sequenzabgleichung der Immunogenregion über die Spezies hinweg durchzuführen, um die erwartete Reaktivität sicherzustellen. Führen Sie eine Validierung mit geeigneten Kontrollen durch.
• Für ELISA-Anwendungen sollten Beschichtungsantigen und Antikörperkonzentration optimiert werden; potenzielle Probleme mit hohem Hintergrund aufgrund der polyklonalen Natur sind zu berücksichtigen.

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