Kaninchen-polyklonaler Anti-HBGP1-Antikörper für WB, ELISA - P69891

Wichtige Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation der Hämoglobin-Untereinheit Gamma-1

• Die Hämoglobin-Untereinheit Gamma-1 (HBG1) ist Bestandteil des fetalen Hämoglobins (HbF), eines Tetramers aus zwei Alpha-Ketten und zwei Gamma-Ketten.
• HbF ist während der fetalen Entwicklung das vorherrschende Hämoglobin und wird nach der Geburt allmählich durch adultes Hämoglobin (HbA) ersetzt. Es besitzt im Vergleich zu adultem Hämoglobin eine höhere Sauerstoffaffinität und erleichtert dadurch den Sauerstofftransfer von der Mutter zum Fötus.
• Das HBG1-Gen gehört zum Beta-Globin-Gencluster auf Chromosom 11. Es gibt ein eng verwandtes Gamma-2-Gen (HBG2), das sich nur durch eine Aminosäure unterscheidet; die Gamma-1-Kette ist auch als A-Gamma-Kette bekannt, während Gamma-2 die G-Gamma-Kette ist.
• HBG1 wird spezifisch in roten Blutkörperchen exprimiert, und seine Expression wird entwicklungsabhängig reguliert. In adulten erythroiden Zellen ist das Gen stillgelegt, außer unter bestimmten pathologischen Bedingungen oder bei hereditärer Persistenz des fetalen Hämoglobins (HPFH).
• Das Protein ist ein Häm-bindendes Protein und für den Sauerstofftransport unerlässlich. Es enthält Eisen und unterliegt, wie proteomische Studien zeigen, posttranslationalen Modifikationen einschließlich Acetylierung, Phosphorylierung und S-Nitrosylierung.
• Strukturelle Studien (Schlüsselwort 3D-Struktur) haben die Konformation des fetalen Hämoglobins aufgeklärt. Die direkte Proteinsequenzierung hat die Primärstruktur bestätigt.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das der N-terminalen Region (AS 1-100) des humanen HBG1 entspricht. Aufgrund der hohen Sequenzähnlichkeit mit HBG2, das sich in dieser Region nur durch eine Aminosäure unterscheidet, kann der Antikörper mit HBG2 kreuzreagieren. Validieren Sie die Spezifität in relevanten Probensystemen.
• Beim Western Blot wird eine Bande bei etwa 16 kDa erwartet. Verwenden Sie Positivkontrollen wie Lysat aus fötalem Lebergewebe oder Nabelschnurblut, die hohe HBG1-Spiegel exprimieren. Achten Sie auf eine korrekte Proteinbeladung und einen ordnungsgemäßen Transfer.
• Für den ELISA sollten Sie rekombinantes HBG1-Protein oder gereinigtes HbF als Beschichtungsantigen verwenden. Die berichtete Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte weist auf konservierte Epitope hin. Bestätigen Sie jedoch die Reaktivität in diesen Spezies durch Sequenzalignment und Pilotexperimente.
• Fügen Sie stets geeignete Positiv- und Negativkontrollen hinzu, um die Ergebnisse korrekt zu interpretieren. Titrieren Sie den Antikörper, um in Ihrem spezifischen Versuchsaufbau ein optimales Signal-Rausch-Verhältnis zu erzielen.

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