Anti-HASPIN Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q8TF76

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: HASPIN-Funktion und -Lokalisation

• Serin/Threonin-Proteinkinase, die während der Mitose die Phosphorylierung von Histon H3 an Threonin-3 (H3T3ph) katalysiert. Diese Modifikation ist entscheidend für die korrekte Positionierung und Aktivierung des chromosomalen Passagierkomplexes (CPC) an den Zentromeren und gewährleistet so einen korrekten Chromatid-Zusammenhalt, die Ausrichtung der Metaphase-Chromosomen und einen normalen Zellzyklusfortschritt. Verwandte Referenzen:
• Das Protein wird stark in Hoden, Thymus und Knochenmark exprimiert, mit geringeren Mengen in Prostata, Darm, Lunge, Milz und Lymphknoten. Es wird auch in fetaler Haut, Leber, Niere und Dünndarm nachgewiesen und findet sich in proliferierenden, aber nicht in nicht-proliferierenden Zelllinien, was auf eine Rolle bei der Zellteilung hindeutet.
• HASPIN lokalisiert im Zellkern, an Chromosomen, im Zytoplasma und an Spindelmikrotubuli, was auf eine dynamische subzelluläre Verteilung während der Zellzyklusphasen hindeutet.
• Gehört zur Proteinkinase-Superfamilie und enthält eine atypische Kinasedomäne; es benötigt für seine Aktivität Magnesium und ATP, wie durch seine ATP-Bindungs- und Nukleotid-Bindungseigenschaften angezeigt wird.
• Unterliegt alternativem Spleißen, was zu mehreren Isoformen führt. Das Referenzproteom identifiziert es als Phosphoprotein, was weiterhin auf eine Regulation durch posttranslationale Modifikationen hindeutet.
• Auch bekannt als Germ cell-specific gene 2 protein (GSG2) und Haploid germ cell-specific nuclear protein kinase, was seine ursprüngliche Identifizierung in Keimzellen widerspiegelt, obwohl seine Funktionen auf die Mitose somatischer Zellen ausgeweitet sind.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einem rekombinanten Fragment, das die Aminosäuren 290-470 von humanem HASPIN abdeckt. Diese Region liegt innerhalb der Kinasedomäne, die gut konserviert ist und möglicherweise zur beobachteten Kreuzreaktivität mit der Maus beiträgt.
• Für Western Blotting ist zu beachten, dass das vorhergesagte Molekulargewicht etwa 88 kDa beträgt. Validieren Sie mit geeigneten positiven Kontrollen wie Hoden- oder proliferierenden Zelllinien.
• Verwenden Sie in ELISA rekombinantes HASPIN oder Peptid-Antigene, um die Reaktivität zu bestätigen. Aufgrund der polyklonalen Natur kann der Antikörper mehrere Epitope erkennen; eine Titration wird empfohlen.
• Da HASPIN zellzyklusreguliert ist, können Probenzeitpunkt und -synchronisation für den Nachweis entscheidend sein. Untersuchen Sie die Expression in mitotisch aktiven Zellen.

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