Anti-HAGH Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q16775

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: HAGH-Funktion und -Lokalisierung

• HAGH kodiert die Hydroxyacylglutathion-Hydrolase, ein mitochondriales und zytoplasmatisches Enzym, das auch als Glyoxalase II (Glx II) bekannt ist.
• Das Enzym fungiert als Thiolesterase und katalysiert die Hydrolyse von S-D-Lactoyl-Glutathion in Glutathion und D-Milchsäure, einen kritischen Schritt im Glyoxalase-Weg zur Detoxifizierung von Methylglyoxal.
• HAGH gehört zur Superfamilie der Metallo-Beta-Lactamasen und benötigt Zinkionen für seine katalytische Aktivität, wobei die Zinkbindung am aktiven Zentrum für die Funktion unerlässlich ist.
• Die subzelluläre Lokalisierung umfasst die mitochondriale Matrix und das Zytoplasma, was ihrer Rolle in beiden Kompartimenten bei der Verstoffwechselung toxischer Alpha-Oxoaldehyde entspricht.
• Alternatives Spleißen und alternativer Initiationsstart erzeugen mehrere Isoformen, was zur funktionellen Vielfalt und gewebsspezifischen Regulation beiträgt.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung, und das Protein wurde durch direkte Proteinsequenzierung und Proteomics-Ansätze identifiziert.
• Die Gewebeexpression ist in Leber und Niere prominent, Organen mit hoher Detoxifizierungsaktivität.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 1–260 von humanem HAGH und deckt einen großen Teil des Proteins ab, was helfen kann, Antikörper zu erzeugen, die mehrere Epitope erkennen.
• Für den Western Blot ist eine Bande um 34 kDa zu erwarten; erwägen Sie die Optimierung der Lysatpräparation, um mitochondriale Fraktionen zu erhalten, wenn der mitochondriale Pool anvisiert wird.
• Für die Immunfluoreszenz/Immunzytochemie sollten geeignete Kontrollen eingeschlossen werden, um mitochondriale oder zytoplasmische Färbemuster je nach Zelltyp und Fixierungsbedingungen zu bestätigen.
• Die ELISA-Leistung sollte mit rekombinantem Protein oder bekannten positiven Kontrollen validiert werden, da polyklonale Antikörper Chargen-zu-Chargen-Schwankungen aufweisen können; die Kreuzreaktivität mit murinen und ratigen Homologen kann für Multi-Spezies-Assays genutzt werden.

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