Anti-GZMA Kaninchen-polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P12544

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Granzym A

• Granzym A, auch bekannt als CTL-Tryptase, Fragmentin-1, Hanukkah-Faktor (HF), kodiert durch das GZMA-Gen (CTLA3, HFSP), ist eine reichlich vorhandene Serinprotease, die in den zytoplasmatischen Granulen von zytotoxischen T-Zellen und natürlichen Killerzellen (NK-Zellen) vorkommt.
• Es induziert caspaseunabhängige Pyroptose in Zielzellen, nachdem es über die immunologische Synapse abgegeben wurde, und spaltet nach Lysin- oder Argininresten. Verwandte Referenzen: PMID:12819770, PMID:32299851, PMID:3257574
• Sobald GZMA in der Zielzelle angekommen ist, spaltet es Gasdermin-B (GSDMB) und setzt seine porenbildende Einheit frei, um Pyroptose und Zelltod auszulösen. Verwandte Referenzen: PMID:32299851, PMID:34022140, PMID:36157507
• Es spaltet außerdem APEX1 nach Lys-31 und zerstört dessen oxidative Reparaturaktivität. Verwandte Referenzen: PMID:12524539
• GZMA spaltet das Nukleosomen-Assemblierungsprotein SET nach Lys-189, stört die Nukleosomenassemblierung und ermöglicht dem SET-Komplex die Migration in den Zellkern, um DNA zu schneiden und abzubauen. Verwandte Referenzen: PMID:11555662, PMID:12628186, PMID:16818237
• Subzellulär ist Granzym A in zytoplasmatischen Granulen lokalisiert und wird bei Degranulation sezerniert.
• Als Disulfid-verknüpftes Glykoprotein wird es zunächst als Zymogen produziert und ist eine gut charakterisierte Serinprotease mit verfügbaren 3D-Strukturen.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Für das Western Blotting ist eine Bande von etwa 29 kDa zu erwarten; validieren Sie die Detektion mit positiven Kontrolllysaten aus aktivierten zytotoxischen T-Zellen oder NK-Zelllinien.
• Bei Immunfluoreszenz/Immunozytochemie ist eine Permeabilisierung erforderlich, um granuläres zytoplasmatisches GZMA nachzuweisen. Eine Co-Färbung mit Perforin oder CD8 kann die Spezifität für zytotoxische Zellen bestätigen.
• Wenn Sie einen ELISA durchführen, sollten Sie rekombinantes menschliches GZMA als Standard verwenden und die Linearität in der relevanten Probenmatrix überprüfen.
• Dieser Antikörper weist Kreuzreaktivität mit GZMA von Maus und Ratte auf; bei quantitativen Vergleichen zwischen Arten wird jedoch eine Sequenzalignment der Immunogenregion empfohlen.

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