Anti-GZMA Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IP, IF/ICC, ELISA - P12544

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Granzym A

• Granzym A (GZMA), auch bekannt als CTL-Tryptase, Fragmentin-1 und Hanukkah-Faktor (HF), ist eine Serinprotease, die reichlich in den zytosolischen Granula von zytotoxischen T-Zellen und NK-Zellen exprimiert wird.
• Nach der Lieferung in Zielzellen über die immunologische Synapse löst GZMA eine kaspaseunabhängige Pyroptose aus, indem es Gasdermin-B (GSDMB) spaltet und seine porenbildende Einheit freisetzt, um die Lyse der Zielzelle zu induzieren (PubMed:32299851, PubMed:34022140, PubMed:36157507).
  Verwandte Referenzen:
  PMID:32299851 PMID:34022140 PMID:36157507
• Es spaltet nach Lys- oder Arg-Resten (PubMed:12819770, PubMed:32299851).
  Verwandte Referenzen:
  PMID:12819770 PMID:32299851
• Weitere Substrate sind das oxidative Reparaturenzym APEX1, geschnitten an Lys-31 (PubMed:12524539), und das Nukleosomen-Assemblierungsprotein SET, geschnitten an Lys-189, um den DNA-Abbau zu fördern (PubMed:11555662, PubMed:12628186, PubMed:16818237).
  Verwandte Referenzen:
  APEX1: PMID:12524539
  SET: PMID:11555662 PMID:12628186 PMID:16818237
• GZMA lokalisiert sich in zytoplasmatischen Granula und wird nach Erkennung der Zielzelle in die immunologische Synapse sezerniert.
• Das Protein ist ein Glykoprotein mit Disulfidbindungen und wird zunächst als inaktiver Zymogen synthetisiert, das für die Aktivierung einer proteolytischen Prozessierung bedarf.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für das Western Blotting erwarten Sie eine Bande bei etwa 29 kDa unter reduzierenden Bedingungen; validieren Sie in relevanten menschlichen Zelllinien wie zytotoxischen T-Zellen oder NK-Zellen.
• Bei der Durchführung von Immunfluoreszenz oder Immunzytochemie beachten Sie die Permeabilisierung, um die granuläre zytoplasmatische Färbung sichtbar zu machen.
• Für Immunpräzipitation und ELISA optimieren Sie die Antikörperverdünnung in Ihrer spezifischen Probenmatrix.
• Verwenden Sie geeignete Positiv- und Negativkontrollen (z. B. GZMA-exprimierende vs. Knockout-Zelllinien), um die Spezifität zu bestätigen.

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