Anti-GUCY2D-Polyklonaler Antikörper für WB und ELISA - Q02846

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: GUCY2D-Funktion und -Lokalisation

• GUCY2D, auch bekannt als retinale Guanylylcyclase 1 (ROS-GC, GC-E), ist ein membranständiges Enzym, das vom GUCY2D-Gen beim Menschen kodiert wird. Zu seinen zahlreichen krankheitsassoziierten Aliasen gehören LCA1, CORD6 und CSNB1I.
• GUCY2D katalysiert die Umwandlung von GTP zu cGMP, einem wichtigen sekundären Botenstoff in Photorezeptorzellen, und gleicht so die während der Phototransduktion in Stäbchen und Zapfen verbrauchten cGMP-Spiegel wieder auf. Diese Aktivität ist für die visuelle Signaltransduktion entscheidend (PubMed:15123990, PubMed:21928830, PubMed:26100624). Verwandte Referenzen: PMID:15123990 PMID:21928830 PMID:26100624
• Es gibt Hinweise darauf, dass GUCY2D möglicherweise auch am Trafficking von membrangebundenen Proteinen zur Photorezeptor-Außensegmentmembran beteiligt ist (By similarity).
• Das Protein lokalisiert primär in der Photorezeptor-Außensegmentmembran und der endoplasmatischen Retikulummembran, was mit seiner Rolle in der sensorischen Transduktion und Proteinprozessierung übereinstimmt.
• GUCY2D ist ein Glykoprotein, das mehrere Transmembranhelices, eine Disulfidbindung und ein Signalpeptid enthält, was für seine Membranintegration und Prozessierung im sekretorischen Weg charakteristisch ist.
• Mutationen in GUCY2D sind mit mehreren erblichen Netzhautdystrophien assoziiert, darunter der Leber'schen kongenitalen Amaurose (LCA1), der Zapfen-Stäbchen-Dystrophie (CORD6) und der kongenitalen stationären Nachtblindheit, was seine essentielle Rolle für das Sehvermögen unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Immunogendesign: Das rekombinante Fusionsprotein-Immunogen entspricht der N-terminalen Region (aa 52-350) des humanen GUCY2D, die möglicherweise auf die extrazelluläre/lumenale Domäne abzielt. Dieses rationale Design gewährleistet die Antikörperspezifität und vermeidet gleichzeitig hochhydrophobe Transmembranregionen.
• Western Blot (WB): Basierend auf dem berechneten Molekulargewicht von ~120 kDa ist eine Bande bei etwa 120 kDa zu erwarten. Aufgrund von Glykosylierung und anderen Modifikationen kann die tatsächliche Wanderung variieren. Verwenden Sie geeignete Kontrollen und validieren Sie in retinalen oder photorezeptorstämmigen Proben.
• ELISA: Der Antikörper ist für ELISA geeignet. Erwägen Sie ein indirektes ELISA-Format und validieren Sie es unter Verwendung von rekombinantem Protein oder Zelllysaten, die GUCY2D exprimieren. Die Kreuzreaktivität mit murinen und Ratten-Orthologen kann für translationale Studien vorteilhaft sein.
• Probenvorbereitung: Für Membranproteine wie GUCY2D ist eine ausreichende Solubilisierung mit geeigneten Detergenzien sicherzustellen. Vermeiden Sie das Kochen von Proben, um Aggregation zu verhindern. Optimieren Sie die Denaturierungsbedingungen für Ihren spezifischen Versuchsaufbau.

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