Anti-Guanylyl-Cyclase beta 1 (GUCY1B3) monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q02153

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Guanylyl-Cyclase beta 1 Funktion und Lokalisierung

• Guanylat-Cyclase lösliche Untereinheit beta-1 (GUCY1B3) ist das Proteinprodukt des GUCY1B1-Gens; es ist auch bekannt als GCS-beta-3, lösliche Guanylat-Cyclase kleine Untereinheit und Guanylyl-Cyclase beta 1.
• Diese Untereinheit bildet mit einer Alpha-Untereinheit ein Heterodimer, das die lösliche Guanylat-Cyclase, den primären Rezeptor für Stickstoffmonoxid (NO), bildet. Nach NO-Bindung katalysiert das Enzym die Umwandlung von GTP in cGMP, einen wichtigen sekundären Botenstoff, der Vasodilatation, Neurotransmission und andere physiologische Prozesse vermittelt.
• GUCY1B3 ist ein Mitglied der Adenylyl-Cyclase-4/Guanylyl-Cyclase-Familie und enthält eine Häm-bindende Domäne, die NO erkennt, eine zentrale GTPase-Region und eine katalytische Cyclase-Domäne.
• Auf subzellulärer Ebene ist das Protein hauptsächlich im Zytoplasma lokalisiert, was seiner Rolle als lösliches Enzym entspricht.
• Daten zur Gewebespezifität deuten auf Expression im Gehirn hin, insbesondere im Kortex und Kleinhirn, wo die Stickstoffmonoxid-cGMP-Signalübertragung synaptische Plastizität und neuronale Funktion reguliert.
• Obwohl der UniProt-Eintrag alternatives Spleißen als Schlüsselwort aufführt, werden für diese Untereinheit über die kanonische Sequenz hinaus keine spezifischen Isoformen beschrieben.
• Mit GUCY1B3 assoziierte Schlüsselwörter umfassen 3D-Struktur, cGMP-Biosynthese, Zytoplasma, Häm, Eisen, Metallbindung und GTP-Bindung, was seine enzymatischen und regulatorischen Eigenschaften widerspiegelt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen besteht aus einem synthetischen Peptid, das die N-terminale Region (Aminosäuren 1–100) abdeckt, was auf den Nachweis von vollständigem GUCY1B3 hindeutet; Spezifität mit geeigneten Kontrollen überprüfen.
• Für Western Blotting wird die Zielbande bei etwa 71 kDa erwartet (kanonisches Molekulargewicht ~70,5 kDa); Erwägen Sie die Verwendung von reduzierenden und nicht-reduzierenden Bedingungen, um potenzielle Dimerisierungsartefakte zu bewerten.
• Bei IHC-P optimieren Sie Antigen-Retrieval-Protokolle und validieren Sie Färbemuster in positiven Geweben wie Gehirnrinde und Kleinhirn, die GUCY1B3 auf nachweisbaren Niveaus exprimieren.
• IF/ICC-Experimente sollten ein zytoplasmatisches Signal ergeben; Co-Lokalisierungsstudien mit Organellenmarkern können die subzelluläre Verteilung bestätigen helfen.
• ELISA-Anwendungen können den Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz nutzen; für Sandwich-Assays mit einem Anti-Alpha-Untereinheit- oder Anti-GUCY1B3-Antikörper aus einem anderen Wirt kombinieren.
• Angesichts der Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte ist dieser Antikörper für Studien in gängigen Nagetiermodellen geeignet; validieren Sie jedoch die Leistung in jedem Gewebe oder jeder Zelllinie der jeweiligen Spezies aufgrund möglicher Sequenzvariationen.
• Da die Aktivität der löslichen Guanylat-Cyclase von Häm und NO abhängt, sollten Sie bedenken, ob Ihre experimentellen Bedingungen (z. B. Zellstimulation mit NO-Donoren) die Epitopzugänglichkeit oder Proteinkonformation beeinflussen könnten.

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