Anti-GTPBP4 Kaninchen-Polyclonalkörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9BZE4

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von GTPBP4

• GTPBP4, auch bekannt als Nucleoläres GTP-bindendes Protein 1 (NOG1), Chronisches Nierenversagen-Genprotein (CRFG) und GTP-bindendes Protein NGB, ist ein Mitglied der Familie der GTP-bindenden Proteine.
• Wirkt als GTPase bei der Biogenese der 60S-Ribosomenuntereinheit, unerlässlich für die Ribosomenassemblierung und Translation (PubMed:32669547). Verwandte Referenzen: PMID:32669547
• Agiert als Repressor des Tumorproteins TP53, verhindert dessen Stabilisierung und hemmt dadurch den Zellzyklusarrest (PubMed:20308539). Verwandte Referenzen: PMID:20308539
• Lokalisiert überwiegend im Nukleolus, dem Ort der Ribosomenbiogenese.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung, Phosphorylierung und die Bildung von Isopeptidbindungen (ubiquitin-ähnliche Konjugation), die seine Aktivität und Stabilität regulieren können.
• Das Protein enthält GTP-bindende und nukleotidbindende Domänen, wodurch es als nukleoläre GTPase klassifiziert wird.
• Alternatives Spleißen des GTPBP4-Gens ergibt mehrere Isoformen, wobei die Funktionen einzelner Isoformen noch nicht vollständig charakterisiert sind.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Das Immunogen ist ein rekombinantes Fusionsprotein entsprechend den Aminosäuren 385–634 von humanem GTPBP4, das den C-terminalen Bereich abdeckt. Dieser Bereich weist Homologie zu Maus und Ratte auf, was wahrscheinlich zur beobachteten Kreuzreaktivität beiträgt.
• Für Western Blot (WB) beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht 74 kDa; verwenden Sie eine geeignete Gelprozentangabe und Ladekontrollen. Validieren Sie den Antikörper mit einem Positivkontrolllysat.
• Bei der Immunhistochemie (IHC-P) erwägen Sie die Optimierung der Antigenrückgewinnungsmethoden (z. B. hitzeinduzierte Epitoprückgewinnung) und fügen Sie eine Kontrolle ohne primären Antikörper hinzu, um die Hintergrundfärbung zu beurteilen.
• Für Immunfluoreszenz (IF/ICC) ist GTPBP4 nukleolär lokalisiert, daher wird eine Permeabilisierung mit Detergenzien wie Triton X-100 empfohlen, um das nukleäre Kompartiment zugänglich zu machen. Bestätigen Sie die Lokalisation mit einem Kernmarker.
• Bei ELISA und anderen Immunoassays kann eine Titrierung des Antikörpers und für polyklonale Antikörper optimierte Blockierungspuffer erforderlich sein, um unspezifische Bindung zu reduzieren.
• Die Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte sollte im entsprechenden Gewebe oder der entsprechenden Zelllinie mit artspezifischen Positiv- und Negativkontrollen bestätigt werden.

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