Anti-GTF2H1 Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P32780

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: GTF2H1-Funktion und -Lokalisierung

• GTF2H1, auch bekannt als p62 oder BTF2, ist die 62 kDa Untereinheit des Kernkomplexes des allgemeinen Transkriptionsfaktors IIH (TFIIH), der eine Doppelrolle bei der durch RNA-Polymerase II vermittelten Transkription und der Nukleotid-Exzisionsreparatur (NER) spielt.
• Beim Transkriptionsstart ist TFIIH für das Öffnen des Promoters und den Escape erforderlich; das assoziierte CAK-Kinase-Modul phosphoryliert die C-terminale Domäne (CTD) der RNA-Polymerase II und ermöglicht den Übergang zur Elongation.
• Bei der DNA-Reparatur wickelt TFIIH die DNA um Schadensstellen ab, um die Exzision von Läsionen zu erleichtern, und funktioniert sowohl im globalen Genom als auch in der transkriptionsgekoppelten NER.
• Das Protein lokalisiert sich vorwiegend im Zellkern, was seiner Beteiligung an Transkriptions- und DNA-Reparaturprozessen entspricht.
• Posttranslationale Modifikationen, einschließlich Acetylierung, Phosphorylierung und Ubiquitin-Konjugation, modulieren wahrscheinlich die Stabilität, Aktivität und Wechselwirkungen von GTF2H1 innerhalb des TFIIH-Komplexes.
• Alternatives Spleißen des GTF2H1-Gens führt zu mehreren Isoformen, die zur funktionalen Vielfalt in verschiedenen zellulären Kontexten beitragen können.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 1–425 und deckt einen großen Teil des全长-Proteins (62 kDa) ab. Für den Western Blot ist ein Band in der Nähe von 62 kDa zu erwarten; die Einbeziehung von unbehandelten und DNA-geschädigten Zelllysaten kann helfen, die Spezifität zu bestätigen.
• Aufgrund seiner polyklonalen Natur kann die Signalintensität zwischen Chargen variieren; erwägen Sie, neue Chargen mit bekannten positiven und negativen Kontrollen zu validieren.
• Für die Immunfluoreszenz/Immunzytochemie wird eine Kernfärbung erwartet; optimieren Sie die Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen, um die Antigenität zu erhalten.
• Der Antikörper zeigt Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte, was ihn für Studien in diesen Modellorganismen geeignet macht; jedoch wird eine Validierung im spezifischen experimentellen System empfohlen.
• ELISA-Anwendungen können vorläufige Checkerboard-Titrationen erfordern, um die optimalen Konzentrationen an Beschichtungsantigen und Antikörper zu bestimmen.

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