Anti-GSTM3 polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P21266

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: GSTM3-Funktion und Lokalisierung

• GSTM3 kodiert für Glutathion-S-Transferase Mu 3 (GST Klasse-Mu 3), auch bekannt als hGSTM3-3, ein Mitglied der GST-Mu-Familie von Phase-II-Entgiftungsenzymen.
• Die Hauptfunktion von GSTM3 ist die Katalyse der Konjugation von reduziertem Glutathion an ein breites Spektrum exogener und endogener hydrophober Elektrophile, was deren Ausscheidung erleichtert.
• GSTM3 könnte eine spezialisierte Rolle an der Blut-Hoden- und Blut-Hirn-Schranke spielen, indem es die Aufnahme und Entgiftung von Fremdstoffen und endogenen Verbindungen in diesen Geweben steuert.
• Das Protein wird hauptsächlich im Zytoplasma von Hoden- und Hirnzellen exprimiert, was mit seinen schrankenbezogenen Entgiftungsfunktionen übereinstimmt.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Isopeptidbindungsbildung und Ubiquitin-ähnliche (Ubl) Konjugation, die die Enzymaktivität, Lokalisierung oder Stabilität regulieren können.
• GSTM3 gehört zum Referenzproteom von Homo sapiens und wurde in mehreren Proteomik-Studien identifiziert.
• Das Enzym enthält einen katalytisch aktiven Ort, der Glutathion und hydrophobe Substrate bindet, typisch für die GST-Superfamilie.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 101-225 innerhalb der konservierten C-terminalen Region von humanem GSTM3; diese Sequenz ist zwischen Human, Maus und Ratte hochgradig homolog, was die berichtete Kreuzreaktivität unterstützt.
• Für die Western-Blot-Analyse ist ein Band bei etwa 27 kDa in reduzierten Proben zu erwarten. Positive Kontrollen wie Hoden- oder Hirngewebelysate, in denen GSTM3 angereichert ist, einschließen.
• Für die Immunfluoreszenz/Immunzytochemie (IF/ICC) Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen verwenden, die für zytoplasmatische Proteine geeignet sind. Die Spezifität mit geeigneten Kontrollen validieren, einschließlich Zellen, von denen bekannt ist, dass sie GSTM3 exprimieren.
• Bei der Durchführung von ELISA sollte die Verwendung eines rekombinanten GSTM3-Proteinstandards zur Quantifizierung in Betracht gezogen werden. Der Antikörper kann sowohl im direkten als auch im indirekten ELISA-Format verwendet werden, jedoch wird eine Optimierung der Beschichtungs- und Nachweisbedingungen empfohlen.
• Da GSTM3 ein Entgiftungsenzym ist, kann seine Expression durch Fremdstoffe oder zellulären Stress moduliert werden; erwägen Sie, Proben mit relevanten Induktoren zu behandeln, wenn niedrige endogene Spiegel erwartet werden.

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