Anti-GSK3β monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie (intrazellulär) - P49841

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von GSK3β

• GSK3β ist eine konstitutiv aktive Serin/Threonin-Kinase, die als negativer Regulator in der hormonellen Kontrolle der Glukosehomöostase, dem Wnt-Signalweg sowie der Regulation von Transkriptionsfaktoren und Mikrotubuli wirkt, indem sie Substrate wie Glykogensynthase, β-Catenin und Tau phosphoryliert. Verwandte Referenzen: PMID:11430833 PMID:12554650 PMID:14690523
• Es erfordert eine vorgeschaltete Phosphorylierung der meisten Substrate; in der Skelettmuskulatur phosphoryliert und hemmt es die Glykogensynthase (GYS1), reguliert die Glykogensynthese und kann potenziell zur Insulinresistenz beitragen. Verwandte Referenzen: PMID:8397507 PMID:11430833 PMID:16484495
• Im Wnt-Signalweg bildet GSK3β einen Komplex mit APC, AXIN1 und β-Catenin und phosphoryliert β-Catenin, um dessen Ubiquitin-vermittelte Degradation zu fördern. Verwandte Referenzen: PMID:12554650
• GSK3β phosphoryliert Tau (MAPT) an Thr-548 und reduziert dadurch die Mikrotubuli-Bindung; Tau ist ein Hauptbestandteil der neurofibrillären Tangles bei der Alzheimer-Krankheit, und GSK3β kolokalisiert mit Tau und PKR im Gehirn von Alzheimer-Patienten. Verwandte Referenzen: PMID:14690523
• Es reguliert die zirkadiane Uhr durch Phosphorylierung der Kernuhrproteine BMAL1, CLOCK und PER2 und zielt diese auf die proteasomale Degradation. Verwandte Referenzen: PMID:19946213 PMID:28903391
• GSK3β lokalisiert sich im Zytoplasma, Zellkern und an der Zellmembran; wird stark exprimiert in Hoden, Thymus, Prostata und Ovar, schwach in Lunge, Gehirn und Niere. Das Gen unterliegt alternativem Spleißen, das Protein wird durch Phosphorylierung, ADP-Ribosylierung und Palmitoylierung modifiziert.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Der Antikörper zielt auf ein intrazelluläres Epitop; für intrazelluläre Durchflusszytometrie sind Fixierung und Permeabilisierung erforderlich. Optimieren Sie die Permeabilisierungsbedingungen für Ihren Zelltyp.
• Validieren Sie die GSK3β-Expression in relevanten Zelllinien (z. B. HEK293, HeLa) anhand von Positiv- und Negativkontrollen, um die Spezifität der Färbung zu bestätigen.
• Verwenden Sie geeignete Isotypkontrollen und titrieren Sie den konjugierten Antikörper, um den Hintergrund zu minimieren und das Signal-Rausch-Verhältnis zu optimieren.
• Da das Immunogen die Aminosäuren 321-420 in der Nähe des C-Terminus umfasst, stellen Sie sicher, dass die Epitopzugänglichkeit nicht durch Proteinwechselwirkungen oder Modifikationen maskiert wird.
• Überprüfen Sie die Kompensationseinstellungen, wenn Sie in Mehrfarbenpanels verwenden; beachten Sie die Anleitungen zur spektralen Überlappung des Farbstoffs.
• Es liegen keine Daten zur Kreuzreaktivität vor; überprüfen Sie die Kompatibilität mit Ihrer Zielspezies oder Ihrer interessierenden Zelllinie.

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