Anti-GSDMD-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P57764

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: GSDMD-Funktion und -Lokalisierung

• GSDMD ist ein Vorläufer-Porenbildungsprotein und ein Schlüsselexekutor der Pyroptose stromabwärts der Inflammasom-Aktivierung.
  Verwandte Referenzen: PMID:26375003 PMID:26375259 PMID:27281216
• Die proteolytische Spaltung durch Caspase‑1, ‑4 oder ‑5 setzt die N-terminale Domäne frei, die sich an der Plasmamembran zu 10–15 nm großen Poren oligomerisiert.
  Verwandte Referenzen: PMID:26375003 PMID:26375259 PMID:27281216 PMID:27418190
• Diese Poren vermitteln die Sekretion von reifem IL‑1β und IL‑18 und lösen den entzündlichen Zelltod (Pyroptose) aus.
  Verwandte Referenzen: PMID:27281216 PMID:27418190 PMID:29898893
• Das N-terminale Fragment bindet spezifisch an saure Phospholipide wie Cardiolipin, Phosphatidylinositolphosphate, Phosphatidsäure und Phosphatidylserin, aber nicht an neutrale Lipide.
  Verwandte Referenzen: PMID:27281216 PMID:29898893 PMID:36227980
• GSDMD übt eine direkte bakterizide Aktivität aus, indem es Poren sowohl in grampositiven als auch in gramnegativen Bakterien bildet.
  Verwandte Referenzen: PMID:27281216
• Spaltung durch das Allergen Papain erzeugt ein Fragment, das selektiv IL‑33 freisetzt und die Typ‑2-Immunität antreibt.
  Verwandte Referenzen: PMID:35794369
• Eine caspase‑3/7-abhängige Spaltungsvariante im Dünndarm wirkt als Transkriptions-Coaktivator und fördert die Immuntoleranz durch Induktion von CIITA und MHC‑II.
• GSDMD ist reichlich in differenzierten Epithelzellen der Speiseröhre und des Magens exprimiert und lokalisiert im Zytosol, Inflammasom, Plasmamembran, Mitochondrien und Zellkern.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 346–484 von humanem GSDMD und zielt auf den C-terminalen Teil ab; daher erkennt der Antikörper die Volllänge (~53 kDa) und das caspase-gespaltene C-terminale Fragment (~30 kDa), aber nicht die N-terminale Porenbildungsdomäne.
• Im Western Blot ist ein dominantes Band bei ca. 53 kDa zu erwarten; nach Inflammasom-Aktivierung kann auch ein kleineres Band (~30 kDa), das das C-terminale Spaltprodukt darstellt, sichtbar sein.
• Für die Immunfluoreszenz und Immunhistochemie sollten die Fixierung und Permeabilisierung optimiert werden, um GSDMD an seinen verschiedenen subzellulären Orten (Zytosol, Membran, Mitochondrien, Zellkern) nachzuweisen.
• Dieser polyklonale Antikörper eignet sich gut für die Immunpräzipitation von volllängem GSDMD und seiner Bindungspartner.
• In ELISA-Systemen kann er als Capture- oder Detektionsantikörper dienen; die Paarung mit einem N-terminal-spezifischen GSDMD-Antikörper ermöglicht die Unterscheidung zwischen intakten und verarbeiteten Formen.

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