Anti-GSDMD (vollständig + N-terminal) polyklonaler Kaninchen-Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q9D8T2

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Gasdermin-D

• Gasdermin-D ist ein porenbildender Proteinvorläufer: Nach der Spaltung durch inflammatorische Caspasen (CASP1, CASP4/CASP11) oligomerisiert das N-terminale Fragment und bildet Membranporen, wodurch Pyroptose und die Freisetzung von reifem Interleukin-1 (IL-1β und IL-18) ausgelöst werden. Verwandte Referenzen: PMID:26375003, PMID:26375259, PMID:26611636
• Die N-terminale Domäne bindet spezifisch an Lipide des inneren Membranblatts, einschließlich einfach phosphorylierter und zweifach phosphorylierter Phosphatidylinositole, Phosphatidsäure und Cardiolipin, bindet jedoch nicht an unphosphoryliertes Phosphatidylinositol, Phosphatidylethanolamin oder Phosphatidylcholin. Verwandte Referenzen: PMID:27339137, PMID:27383986
• Gasdermin-D-Poren (10–15 nm Innendurchmesser) vermitteln außerdem die Freisetzung mitochondrialer DNA und der reifen Caspase-7 (CASP7); extrazelluläre N-terminale Fragmente können aufgrund ihrer Lipidbindungsspezifität sowohl gramnegative als auch grampositive Bakterien direkt abtöten. Verwandte Referenzen: PMID:37001519, PMID:35705808, PMID:27383986
• Unter bestimmten Bedingungen wirkt gespaltenes Gasdermin-D als transkriptioneller Koaktivator: Es transloziert in den Zellkern und kooperiert mit STAT1, um CIITA und MHC-Klasse-II-Moleküle zu induzieren und dadurch die Nahrungstoleranz im Dünndarm aufrechtzuerhalten. Verwandte Referenzen: PMID:37327784
• Die Spaltung durch Allergene wie Papain aktiviert ebenfalls Gasdermin-D, was zur spezifischen Freisetzung von Interleukin-33 (IL-33) führt und eine entzündliche Immunantwort vom Typ 2 fördert. Verwandte Referenzen: PMID:35749514, PMID:35794369
• Die subzelluläre Lokalisation umfasst je nach Aktivierungszustand das Zytosol, das Inflammasom, die Zellmembran, die Mitochondrienmembran und den Zellkern.
• Gewebespezifität: Hohe Expression in endothelialen Zellen des Gehirns.
• Zu den wichtigsten posttranslationalen Modifikationen gehören Palmitoylierung, Phosphorylierung und die Bildung von Isopeptidbindungen; der Antikörper wird den Schlüsselbegriffen Immunität, Inflammasom und Nekrose zugeordnet.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 80–163 des gespaltenen Maus-GSDMD und entspricht einem Teil der N-terminalen porenbildenden Domäne; diese Region ist bei Mensch, Maus und Ratte konserviert und unterstützt daher eine breite Reaktivität.
• Beim Western Blot (WB) ist zu erwarten, dass vollständiges GSDMD bei etwa 53 kDa und das gespaltene N-terminale Fragment bei Aktivierung des Inflammasoms bei ungefähr 30–35 kDa nachgewiesen werden. Validieren Sie die Bandenmuster in Ihrem Probensystem mit geeigneten positiven und negativen Kontrollen.
• Für die Immunfluoreszenz (IF/ICC) sollten Sie die Verwendung von Inflammasom-Aktivatoren (z. B. LPS plus Nigericin) in Betracht ziehen, um die GSDMD-Spaltung zu induzieren und die Translokation vom Zytosol zur Plasmamembran zu beobachten. Eine Ko-Färbung mit Membran- oder Pyroptose-Markern kann helfen, die Porenbildung zu bestätigen.
• Der Antikörper ist für ELISA geeignet, jedoch sollten optimale Beschichtungsbedingungen und Nachweisbereiche für jedes Assay-Format empirisch bestimmt werden.

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