Anti-GRK5 polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P34947

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von GRK5

• Kodiert durch das GRK5-Gen (auch bekannt als GPRK5), ist GRK5 ein Mitglied der Familie der G-Protein-gekoppelten Rezeptorkinasen (GRK), das aktivierte GPCRs spezifisch phosphoryliert und die Desensibilisierung sowie Internalisierung durch Rekrutierung von Beta-Arrestin einleitet.
• Neben GPCRs phosphoryliert GRK5 mehrere nicht-Rezeptor-Substrate, darunter ST13 (Regulierung des Chemokinrezeptor-Transports), TP53/p53 (Hemmung der Apoptose), HDAC5 (Förderung des Kernexports und Verstärkung der MEF2-vermittelten Transkription), ARRB1 und sogar LRP6 im Wnt-Signalweg.
• Subzellulär lokalisiert sich GRK5 dynamisch im Zytoplasma, Kern und an der Zellmembran, was mit seinen Rollen bei der Regulation von Plasmamembranrezeptoren und der nukleären Transkriptionsmodulation übereinstimmt.
• Die Gewebeverteilung ist breit, aber angereichert: Die höchsten Gehalte werden in Herz, Plazenta und Lunge nachgewiesen, mit mäßiger Expression in Skelettmuskel, Gehirn, Leber, Bauchspeicheldrüse und Niere.
• Die Kinaseaktivität ist ATP-abhängig, das Protein enthält lipidbindende Domänen, die die Membranassoziation ermöglichen; es handelt sich zudem um ein Phosphoprotein, das regulatorischen Modifikationen unterliegt.
• Funktionelle Schlüsselbegriffe umfassen Apoptose-Signalgebung, Beteiligung am Wnt-Signalweg und Serin/Threonin-Kinase-Aktivität, was seine multifunktionalen Rollen bei zellulärer Signalgebung und Krankheit unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für das Western Blotting bereiten Sie Ganzzelllysate aus Geweben mit hoher GRK5-Expression (z. B. Herz, Lunge) vor. Unter reduzierenden Bedingungen ist eine Bande bei etwa 68 kDa zu erwarten; validieren Sie mit einem Positivkontrolllysat.
• Bei der Immunhistochemie (IHC-P) kann eine standardmäßige Antigenretrieval (z. B. Citratpuffer pH 6,0) verwendet werden; fügen Sie bekannte positive Gewebe wie Herzmuskel und Negativkontrollen hinzu, um die Spezifität zu beurteilen.
• Für die Immunfluoreszenz (IF/ICC) können Zelllinien verwendet werden, die GRK5 endogen exprimieren. Fixierungs-/Permeabilisierungsbedingungen sollten optimiert werden, und Kolokalisationsstudien mit Membran- oder Kernmarkern können die Lokalisationsdynamik bestätigen.
• Als polyklonaler Antikörper wird für quantitative Assays wie ELISA empfohlen, die Chargenkonsistenz zu überprüfen. Verwenden Sie rekombinantes GRK5-Protein als Standard.

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