Anti-GRK2 monoklonaler Antikörper [KO validiert] für WB, IF/ICC, ELISA - P25098

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: GRK2-Funktion und -Lokalisierung

• GRK2 (G-Protein-gekoppelter Rezeptorkinase 2), auch bekannt als beta-adrenerger Rezeptorkinase 1 (BARK1), ist eine Serin/Threonin-Kinase, die spezifisch aktivierte G-Protein-gekoppelte Rezeptoren (GPCRs) phosphoryliert, was die β-Arestin-vermittelte Rezeptorinternalisierung und Desensibilisierung einleitet (PubMed:14976224, PubMed:16179383, PubMed:19306925). Verwandte Referenzen: PMID:14976224 PMID:16179383 PMID:19306925
• Es phosphoryliert die agonistenbesetzte Form von beta-adrenergen Rezeptoren (ADRB2) und verwandten Katecholaminrezeptoren, reguliert die Kontraktionsratenantworten von Kardiomyozyten und fördert die Rezeptordesensibilisierung (PubMed:19715378). Verwandte Referenzen: PMID:19715378
• GRK2 desensibilisiert Anaphylatoxin-Rezeptoren C3AR1 und C5AR1 nach Ligandenbindung und moduliert Immunzellantworten (PubMed:21799898, PubMed:23077507). Verwandte Referenzen: PMID:21799898 PMID:23077507
• Es reguliert den ziliären Smoothened (SMO)-Signalweg positiv durch Phosphorylierung von SMO (Erleichterung seines Transports in das Cilium) und GPR161 (Förderung seines ziliären Exports), Schlüsselereignisse der Hedgehog-Signalgebung (PubMed:39138140, PubMed:40384633). Verwandte Referenzen: PMID:39138140 PMID:40384633
• GRK2 moduliert die LPAR1-Signalgebung, indem es mit RALA um die Rezeptorbindung konkurriert, was die Signaleigenschaften beeinflusst und LPAR1/LPAR2 auf phosphorylationsunabhängige Weise desensibilisiert (PubMed:19306925). Verwandte Referenzen: PMID:19306925
• Subzellulär lokalisiert sich GRK2 im Zytoplasma, der Zellmembran, Zellprojektionen (einschließlich der ziliären Membran) und synaptischen Kompartimenten (Postsynapse und Präsynapse), was seine vielfältigen regulatorischen Rollen widerspiegelt.
• Die Gewebeexpression wird in peripheren Blutzellen nachgewiesen, was ihre Bedeutung im Immun- und Herz-Kreislauf-System unterstreicht.
• Zu den wichtigsten molekularen Merkmalen gehören ATP-Bindung, Nukleotid-Bindung, Kinase-Aktivität, Phosphorylierung und Transferase-Aktivität, wie in UniProt annotiert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einem Peptid innerhalb der Reste 590–689, was die Erkennung eines linearen Epitops nahelegt; denaturierendes Western Blotting (WB) und ELISA werden voraussichtlich gut funktionieren.
• KO-Validierung deutet auf eine hohe Spezifität hin; erwägen Sie die Verwendung von GRK2-Knockout-Zelllysaten als Negativkontrolle im WB, um die Bandenidentität zu bestätigen.
• Eine Bande bei ~80 kDa wird vorhergesagt; validieren Sie ihre Wanderung in Ihrem Probensystem mit geeigneten Molekulargewichtsmarkern.
• Für die Immunfluoreszenz (IF/ICC) zeigt GRK2 eine Membran- und zytoplasmatische Färbung; sorgen Sie für eine ausreichende Permeabilisierung und erwägen Sie eine Co-Färbung mit Organellmarkern.
• Die Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte macht diesen Antikörper geeignet für Studien an gängigen Modellorganismen; verifizieren Sie das Signal in relevanten Geweben oder Zelllinien.
• Da GRK2 an der GPCR-Desensibilisierung beteiligt ist, können funktionelle Assays (z. B. Rezeptorinternalisierung oder β-Arestin-Rekrutierung) die Nachweisexperimente ergänzen.

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