Polykolonaler Anti-GRIA3-Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P42263

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von GRIA3

• GRIA3/AMPA-Rezeptor 3 ist ein ligandengesteuerter Kationenkanal, der die schnelle erregende synaptische Übertragung vermittelt, indem er nach der Bindung von L-Glutamat den Kalziumeinstrom steuert, was zu einer schnellen Desensibilisierung in einen inaktiven Zustand mit gebundenem Agonisten führt (PubMed:17989220). Zugehörige Referenzen: PMID:17989220

• Die Interaktion mit CACNG8 moduliert die Rezeptorkinetik und induziert eine Resensibilisierung, die durch eine verzögerte Zunahme des Stromflusses während einer anhaltenden Glutamatapplikation gekennzeichnet ist (PubMed:21172611). Zugehörige Referenzen: PMID:21172611

• Der Rezeptor ist in der postsynaptischen Zellmembran lokalisiert und insbesondere in der postsynaptischen Dichte angereichert, wo er eine zentrale Rolle bei der synaptischen Plastizität und der Langzeitpotenzierung spielt (durch Ähnlichkeit).

• GRIA3 unterliegt umfangreichen posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Glykosylierung, Disulfidbrückenbildung, Phosphorylierung und Palmitoylierung, die seinen Transport, seine Lokalisation und seine Funktion regulieren.

• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen und trägt dadurch zur funktionellen Vielfalt bei der synaptischen Signalübertragung bei.

• Mutationen in GRIA3 werden mit geistiger Behinderung (MRX94/MRXSW) in Verbindung gebracht, was einen Zusammenhang zwischen seiner Fehlfunktion und neurologischen Entwicklungsstörungen herstellt.

• Als Mitglied der AMPA-Rezeptorfamilie weist GRIA3 strukturelle Homologie zu anderen Untereinheiten (GRIA1, GRIA2, GRIA4) auf, und die Zusammensetzung der Untereinheiten bestimmt Kanaleigenschaften wie die Kalziumpermeabilität.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Resten 200–490 des humanen GRIA3, einer Region innerhalb der extrazellulären Domäne. Dies deutet darauf hin, dass der Antikörper bevorzugt oberflächenexponierte oder native Epitope erkennt und sich daher möglicherweise für den immunzytochemischen Nachweis von Rezeptoren auf der Zelloberfläche eignet.

• Beim Western Blot wird eine Hauptbande bei etwa 101 kDa erwartet; zusätzlich können Nebenbanden durch alternatives Spleißen oder posttranslationale Modifikationen beobachtet werden. Validieren Sie die Spezifität anhand von Gehirnlysaten oder neuronalen Zelllinien (z. B. SH-SY5Y, primäre kortikale Neuronen).

• Bei Immunfluoreszenz/Immunzytochemie sollten geeignete Kontrollen (z. B. Antigenblockierung, Knockout-Zelllinien) einbezogen werden, um die Spezifität zu bestätigen. Optimieren Sie die Bedingungen für Fixierung und Permeabilisierung; eine Paraformaldehyd-Fixierung mit anschließender milder Permeabilisierung durch Triton X-100 ist ein gängiger Ausgangspunkt.

• Für ELISA-Anwendungen kann dieser Antikörper mit einem passenden monoklonalen oder einem anderen polyklonalen Antikörper kombiniert werden, der gegen ein unterschiedliches Epitop erzeugt wurde, um die Entwicklung eines Sandwich-ELISA zu ermöglichen. Bewerten Sie die Kreuzreaktivität mit anderen AMPA-Rezeptoruntereinheiten (GRIA1, GRIA2, GRIA4), um die Spezifität sicherzustellen.

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