Polyklonaler Anti-GRHL2-Antikörper für WB und ELISA – Q6ISB3

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von GRHL2

• GRHL2 (Grainyhead-like protein 2 homolog), auch bekannt als Brother of mammalian grainyhead (BOM) oder Transkriptionsfaktor CP2-like 3, ist ein Transkriptionsfaktor, der an die Konsensus-DNA-Sequenz 5'-AACCGGTT-3' bindet und sowohl als Aktivator als auch als Repressor von Zielgenen fungiert (nach Ähnlichkeit).
• Er spielt eine wesentliche Rolle bei der primären Neurulation und der Entwicklung des Epithels; gemeinsam mit GRHL3 ist er an der Etablierung unterschiedlicher Verschlusszonen beteiligt und für den Verschluss des rostralen Vorderhirns unerlässlich (PubMed:25152456, PubMed:29309642).
  Zugehörige Referenzen: PMID:25152456 PMID:29309642
• Als Hauptregulator der epithelialen Morphogenese steigert GRHL2 die Expression von Komponenten der Tight Junctions (CLDN3, CLDN4) und von RAB25 und verbessert dadurch die Lokalisation von CLDN4; außerdem stellt er in verschiedenen Epithelien angemessene CDH1-Expressionsniveaus her (nach Ähnlichkeit).
• Bei der epidermalen Morphogenese und Wundheilung weist GRHL2 funktionelle Redundanz mit GRHL3 auf; in der Lunge bildet er mit NKX2-1 einen regulatorischen Kreislauf zur Koordination der Differenzierung von Epithelzellen (nach Ähnlichkeit).
• In Keratinozyten aktiviert GRHL2 die Telomerase, indem er an den TERT-Promotor bindet und die DNA-Methylierung an dessen 5'-CpG-Insel hemmt, möglicherweise durch Beeinträchtigung der DNMT1-Aktivität (PubMed:19015635, PubMed:20938050).
  Zugehörige Referenzen: PMID:19015635 PMID:20938050
• Umgekehrt beeinträchtigt er die Differenzierung von Keratinozyten, indem er Gene im epidermalen Differenzierungskomplex (EDC) sowie GRHL1 und GRHL3 epigenetisch reprimiert (PubMed:23254293).
  Zugehörige Referenzen: PMID:23254293
• Auf subzellulärer Ebene lokalisiert sich GRHL2 im Zellkern und an der Membran, was mit seinen Funktionen bei der Transkription und der Regulation von Zellverbindungen übereinstimmt.
• GRHL2 wird stark in Plazenta, Prostata, Gehirn, Niere und zahlreichen epithelialen Geweben exprimiert; außerdem wird er in der Cochlea und in kornealen Epithelzellen nachgewiesen (PubMed:29499165). Mutationen in GRHL2 werden mit Hornhautdystrophie (PPCD4), nicht-syndromaler Taubheit (DFNA28) und ektodermaler Dysplasie in Verbindung gebracht.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das Immunogen dieses Antikörpers entspricht den Aminosäuren 80–250 des humanen GRHL2 (NP_079191.2), einer Region, die einen Teil der N-terminalen Domäne umfasst. Diese Sequenz ist bei Ratten konserviert (Kreuzreaktivität bestätigt); für andere Spezies sollte die Reaktivität jedoch durch einen Sequenzvergleich überprüft werden.
• Beim Western Blot (WB) beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht von GRHL2 etwa 71 kDa; posttranslationale Modifikationen oder Unterschiede zwischen Isoformen können jedoch zu zusätzlichen Banden führen. Optimieren Sie die Beladungskontrollen und Blockierungsbedingungen.
• Bei ELISA sollte für die Quantifizierung die Verwendung einer Standardkurve mit Peptid oder rekombinantem Protein in Betracht gezogen werden. Aufgrund der polyklonalen Natur sollte die Chargenkonsistenz für reproduzierbare Ergebnisse validiert werden.
• Beim Nachweis von endogenem GRHL2 in Epithelzellen oder Geweben (z. B. Haut, Lunge, Niere) können Kernextraktionsprotokolle das Signal anreichern. Validieren Sie die Spezifität durch siRNA-Knockdown oder parallele Tests mit bekannten negativen Zelllinien.

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