Anti-GRASP65 polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q9BQQ3

Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von GRASP65 (GORASP1)

• GRASP65 (GORASP1, GOLPH5) ist ein wichtiges Strukturprotein des Golgi-Apparats und gehört zur GORASP-Familie. Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen. (Schlüsselwörter: Alternatives Spleißen)
• Es wird für die Bildung und Aufrechterhaltung des Golgi-Bandes benötigt und wirkt zusammen mit GORASP2/GRASP55. Es spielt auch eine Rolle bei der Assemblierung und Membran-Stapelung der Zisternen sowie bei der Reassemblierung der Golgi-Stapel nach dem mitotischen Zerfall.
  Zugehörige Referenzen:
  PMID:33301566
• Die Caspase-vermittelte Spaltung von GRASP65 ist für die Golgi-Fragmentierung während der Apoptose notwendig. (Durch Ähnlichkeit)
• GRASP65 vermittelt über die Interaktion mit GOLGA2/GM130 das Andocken von Transportvesikeln an Golgi-Membranen.
  Zugehörige Referenzen:
  PMID:16489344
• Es erleichtert das durch ER-Stress induzierte unkonventionelle Trafficking von kern-glykosyliertem CFTR zur Zellmembran.
  Zugehörige Referenzen:
  PMID:21884936
• Subzellulär lokalisiert GRASP65 im Golgi-Apparat, spezifisch an der cis-Golgi-Netzwerk-Membran und der Membran des endoplasmatischen Retikulum-Golgi-Intermediärkompartiments.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören Phosphorylierung, Myristoylierung und Zinkbindung. Das Protein ist ein Phosphoprotein, Lipoprotein und metallbindendes Protein.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 221–440 des humanen GRASP65, die sich in der C-terminalen Region befinden. Berücksichtigen Sie bei der Vorhersage der Isoform-Erkennung mögliche Spleißvarianten, die diese Domäne betreffen.
• Validieren Sie den Antikörper für Western Blotting (WB) in humanen Zelllinien; endogenes GRASP65 wandert bei etwa 46 kDa. Spaltfragmente können während der Apoptose auftreten – verwenden Sie geeignete Kontrollen (z. B. mit Staurosporin behandelte Zellen).
• Optimieren Sie bei der Immunfluoreszenz/Immunzytochemie (IF/ICC) die Fixierung (z. B. Methanol oder Paraformaldehyd) und Permeabilisierung, um eine klare Golgi-Färbung zu erzielen. Eine Co-Färbung mit einem Golgi-Marker (z. B. GM130) wird empfohlen.
• Für ELISA kann der Antikörper als Fänger- oder Detektionsreagenz verwendet werden; titrieren Sie, um die optimale Konzentration für Ihr Assay-System zu bestimmen.

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