Anti-GPX3 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB und ELISA - P22352

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: GPX3-Funktion und Lokalisierung

• Glutathionperoxidase 3 (GPX3) ist ein Selenoprotein-Enzym aus der Familie der Glutathionperoxidasen, auch bekannt als extrazelluläre oder Plasma-Glutathionperoxidase (GPx-P/GSHPx-P).
• Es katalysiert die Reduktion von Wasserstoffperoxid, Lipidperoxiden und organischen Hydroperoxiden unter Verwendung von Glutathion als Reduktionsmittel und schützt so Zellen und Enzyme vor oxidativen Schäden.
• Das Vorhandensein eines Selenocystein (Sec)-Rests an seiner aktiven Stelle ist entscheidend für seine Peroxidase-Aktivität; GPX3 wird daher als Selenoprotein klassifiziert.
• GPX3 ist ein sekretiertes Protein, das hauptsächlich im Plasma vorkommt, wo es durch Entgiftung von Peroxiden in der extrazellulären Umgebung zur systemischen antioxidativen Abwehr beiträgt.
• Es wird als Vorläufer mit einem Signalpeptid synthetisiert, das seine Sekretion steuert; das reife Protein hat ein Molekulargewicht von etwa 26 kDa (berechnet 25,5 kDa).
• Dreidimensionale Strukturstudien und direkte Proteinsequenzierung wurden durchgeführt, um seine Identität und funktionellen Stellen zu bestätigen.
• Schlüsselwörter: Oxidoreduktase, Peroxidase, Referenzproteom und Hochvertrauens-Proteomik-Identifikation.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das den Aminosäuren 1-100 von humanem GPX3 (NP_002075.2) entspricht; diese N-terminale Region enthält das Signalpeptid und einen Teil des reifen Proteins, was möglicherweise Antikörper liefert, die sowohl die Vorläufer- als auch die reifen Formen erkennen.
• Für Western Blot (WB) sollten denaturierende und reduzierende Bedingungen in Betracht gezogen werden, und der endogene GPX3-Nachweis in Maus- oder Rattenplasma/Gewebeextrakten sollte aufgrund der berichteten Kreuzreaktivität validiert werden.
• Das vorhergesagte Molekulargewicht beträgt 26 kDa; ein geeigneter Gelprozentsatz (z.B. 12% SDS-PAGE) und Transferbedingungen sollten optimiert werden; ein Band nahe 26 kDa kann beobachtet werden.
• Für ELISA-Anwendungen kann die Beschichtung mit rekombinantem GPX3 oder eingefangenem Plasma-GPX3 verwendet werden; polyklonale Antikörper erfordern möglicherweise eine sorgfältige Titration, um die Spezifität sicherzustellen.
• Als polyklonaler Antikörper sollte die Charge-zu-Charge-Variabilität überwacht werden, und geeignete Kontrollen (z.B. Knockout-Proben, Peptid-Präadsorption) können helfen, die Spezifität zu bestätigen.

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