Anti-GPD2 polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - P43304

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: GPD2-Funktion und Lokalisierung

• GPD2 kodiert für die mitochondriale Glycerin-3-Phosphat-Dehydrogenase (mGDH), ein Flavoprotein-Oxidoreduktase, das die Oxidation von Glycerin-3-phosphat zu Dihydroxyacetonphosphat katalysiert und Elektronen in die Atmungskette einspeist. Es ist ein kalziumresponsives Enzym, das für die Glukosewahrnehmung und Insulinsekretion in pankreatischen Beta-Zellen entscheidend ist.
• Das Protein fungiert als Schlüsselkomponente des Glycerinphosphat-Shuttles, das Reduktionsäquivalente vom cytosolischen NADH auf die mitochondriale Atmungskette überträgt und so Glykolyse und oxidative Phosphorylierung verbindet.
• mGDH ist in der inneren Mitochondrienmembran lokalisiert und enthält ein Transitpeptid zur mitochondrialen Zielsteuerung sowie eine für die enzymatische Aktivität essentielle Flavinadenindinukleotid (FAD)-Bindungsdomäne.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung, und das Protein bindet Kalzium und andere Metallionen, die seine katalytische Funktion modulieren.
• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen; die kanonische Isoform hat ein berechnetes Molekulargewicht von etwa 81 kDa (80853 Da, UniProt P43304).
• Als Mitglied der Glycerin-3-Phosphat-Dehydrogenase-Familie ist GPD2 zentral für den Lipidstoffwechsel und die Energiehomöostase, mit Implikationen für Diabetes und Stoffwechselstörungen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 25–325 von humanem GPD2 und deckt eine Region stromabwärts des mitochondrialen Transitpeptids ab. Dieses Design erkennt möglicherweise bevorzugt die reife, prozessierte Form des Proteins.
• Für den Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht von GPD2 ~81 kDa. Ziehen Sie die Verwendung von Ganzzelllysaten aus pankreatischem, hepatischem oder Muskelgewebe oder aus relevanten Zelllinien wie INS-1 oder HepG2 in Betracht, wo mGDH-Expression erwartet wird.
• Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte ist angegeben; eine Validierung in diesen Spezies wird empfohlen, indem Gewebeproben oder rekombinante Proteinkontrollen verglichen werden, um eine vergleichbare Detektion zu bestätigen.
• Titrieren Sie bei ELISA-Anwendungen sowohl das Beschichtungsantigen (rekombinantes Protein oder Gewebelysat) als auch die Primärantikörperkonzentration, um das Signal-Rausch-Verhältnis zu optimieren. Schließen Sie Kontrollen für Matrixeffekte ein.
• Da die GPD2-Aktivität kalziumabhängig ist, vermeiden Sie Kalziumchelator in Lyse- oder Assay-Puffern, sofern ihre Wirkung nicht experimentell charakterisiert ist.

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