Anti-GPC1 polyklonaler Antikörper für WB und ELISA - P35052

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: GPC1 (Glypican-1) Funktion und Lokalisation

• Glypican-1 (GPC1) ist ein Heparansulfat-Proteoglykan auf der Zelloberfläche, das vom GPC1-Gen beim Menschen kodiert wird und aufgrund von alternatives Spleißen in mehreren Isoformen vorkommt.
• Es fungiert als Korezeptor, bindet über seine Heparansulfat-Seitenketten an Kollagen alpha-4 (V) und ist an der Myelinisierung von Schwann-Zellen beteiligt (By similarity).
• GPC1 könnte als Katalysator bei der Umwandlung des Prionproteins (PrPC) in seine pathogene Scrapie-Form (PrPSc) wirken, indem es deren Interaktion in Lipid Rafts erleichtert.
• Im Skelettmuskel sequestriert GPC1 FGF2 in Lipid Rafts, verhindert so die Bindung von FGF2 an FGFRs und hemmt dadurch die FGF-vermittelte Signalgebung, die für die ordnungsgemäße Differenzierung erforderlich ist.
• Subzellulär befindet sich GPC1 an der Zellmembran, verankert über einen Glycosylphosphatidylinositol(GPI)-Anker, und ist auch in Endosomen sowie sezerniert im extrazellulären Raum zu finden.
• Zu den wichtigsten strukturellen Merkmalen gehören ein Signalpeptid, Disulfidbindungen und Bindungsstellen für Kupfer und Zink, was seine komplexe posttranslationale Regulation widerspiegelt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der C-terminalen Region (Aminosäuren 290-420) von humanem GPC1, was eine spezifische Erkennung des Voll-Längen-Proteins ermöglichen kann. Für Western Blotting sollten reduzierende Bedingungen in Betracht gezogen und die Detektion des vorhergesagten 62 kDa-Bandes in relevanten Zell- oder Gewebelysaten validiert werden.
• Es wird Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte angegeben; Nutzer sollten jedoch die speziesspezifische Reaktivität in ihren experimentellen Systemen aufgrund möglicher Sequenzvariationen überprüfen.
• Für ELISA-Anwendungen sollten die Beschichtungsbedingungen und die Antikörperverdünnung mit rekombinantem GPC1 oder Zellysaten optimiert werden; beachten Sie, dass die Detektion durch den Heparansulfat-Modifikationszustand beeinflusst werden kann.
• Da GPC1 ein GPI-verankertes Membranprotein ist, sollten für verbesserte Detektion in einigen Assays membrangangereicherte Fraktionen oder die Behandlung mit Phosphatidylinositol-spezifischer Phospholipase C (PI-PLC) zur Freisetzung des Proteins in Betracht gezogen werden.

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