Anti-GOT1 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA – P17174

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von GOT1

• GOT1 ist eine zytoplasmatische Aspartat-Aminotransferase, die auch Cystein-Transaminase-Aktivität aufweist und üblicherweise als cAST, SGOT oder cCAT bezeichnet wird. Es gehört zur Familie der Klasse-I Pyridoxalphosphat-abhängigen Aminotransferasen.
• Es katalysiert die reversible Umwandlung von L-Aspartat und α-Ketoglutarat zu Oxalacetat und L-Glutamat und spielt eine Schlüsselrolle bei der Regulierung des Gehalts an Glutamat, dem wichtigsten erregenden Neurotransmitter, im Zentralnervensystem (PubMed:21900944). Verwandte Referenzen: PMID:21900944
• Durch seine Cystein-Transaminase-Aktivität erzeugt GOT1 Mercaptopyruvat, das anschließend durch 3-Mercaptopyruvat-Schwefeltransferase zu Schwefelwasserstoff (H₂S) umgewandelt wird. H₂S dient als wichtiger synaptischer Modulator und Neuroprotektivum im Gehirn. Verwandte Referenzen: PMID:21900944
• GOT1 katalysiert außerdem die Bildung von (2S)-2-Aminobutanoat, einem Nebenprodukt im Cystein-Biosyntheseweg (PubMed:27827456). Verwandte Referenzen: PMID:27827456
• Das Enzym ist an der hepatischen Glukosesynthese während der Entwicklung beteiligt und trägt zur Glyzeroneogenese in Adipozyten bei.
• GOT1 ist im Zytoplasma lokalisiert, ist phosphoryliert bekannt; alternatives Spleißen erzeugt mehrere Protein-Isoformen.
• Strukturelle Studien haben seine dreidimensionale Faltung definiert, und seine Aktivität hängt vom Cofaktor Pyridoxalphosphat ab.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Dieser Antikörper wurde gegen ein synthetisches Peptid-Immunogen erhoben, das sich innerhalb der Aminosäuren 150–250 von menschlichem GOT1 befindet. Bei der Versuchsplanung überprüfen Sie die Sequenzhomologie, wenn Sie nicht-menschliche Spezies verwenden, da Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte beobachtet wurde.
• Für die Western Blotting ist eine Bande bei etwa 46 kDa zu erwarten, die GOT1 entspricht. Optimieren Sie die Probenvorbereitung und Antikörperverdünnung für Ihren spezifischen Probentyp.
• Bei Immunfluoreszenz/Immunzytochemie sollte GOT1 überwiegend im Zytoplasma lokalisiert sein. Fügen Sie geeignete Fixierungs- und Permeabilisierungsschritte hinzu, um die Zugänglichkeit des Antikörpers sicherzustellen.
• Für ELISA-Anwendungen kann der Antikörper sowohl als Capture- als auch als Detektionsreagenz geeignet sein; dennoch wird die Paarung mit einem passenden Antikörper empfohlen und sollte in Ihrem eigenen Assaysystem validiert werden.
• Wie bei jedem Antikörper nur für Forschungszwecke empfehlen wir, den Antikörper unter Ihren genauen experimentellen Bedingungen zu titrieren und geeignete Positiv- und Negativkontrollen einzuschließen.

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