Anti-GOT1-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P17174

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation der Aspartat-Aminotransferase, Zytoplasmatisch (GOT1)

• GOT1 (Glutamat-Oxalacetat-Transaminase 1, zytoplasmatisch) ist auch bekannt als AST, AST1, SGOT, cCAT, cAspAT und GIG18. Es ist eine Pyridoxalphosphat-abhängige Aminotransferase.
• Ihre Hauptreaktion ist die reversible Umwandlung von L-Aspartat und 2-Oxoglutarat zu Oxalacetat und L-Glutamat, wodurch der Aminosäure- und Kohlenhydratstoffwechsel über den Malat-Aspartat-Shuttle verknüpft werden.
• Im Gehirn wirkt GOT1 als Glutamat-Fänger, hilft bei der Regulierung der erregenden Neurotransmission und trägt zum Neuroschutz bei. Verwandte Referenzen: PMID:21900944
• Unter Verwendung von L-Cystein als Substrat produziert GOT1 Mercaptopyruvat, eine Schlüsselvorstufe für die Synthese von Schwefelwasserstoff (H2S). H2S wirkt als synaptischer Modulator und Neuroprotektor. Verwandte Referenzen: PMID:21900944 PMID:27827456
• GOT1 katalysiert auch die Umwandlung von (2S)-2-Aminobutanoat, einem metabolischen Nebenprodukt des Cystein-Biosynthesewegs. Verwandte Referenzen: PMID:27827456
• In der Leber und im Fettgewebe nimmt GOT1 an der Gluconeogenese bzw. Glyceroneogenese teil und beeinflusst so die systemische Energiehomöostase.
• Das Enzym ist vorwiegend im Zytoplasma lokalisiert und unterliegt einer Phosphorylierung, die seine Aktivität modulieren kann.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das zur Erzeugung dieses polyklonalen Antikörpers verwendete Immunogen entspricht den Aminosäuren 244–413 von humanem GOT1, einem Bereich außerhalb des aktiven Zentrums; daher erkennt der Antikörper möglicherweise sowohl die native als auch die denaturierte Form des Proteins.
• Für Western Blot (WB) wird eine Bande bei ca. 46 kDa erwartet. Erwägen Sie die Verwendung von Ganzzell-Lysaten aus gewebereichen GOT1-Quellen wie Leber oder Gehirn als positive Kontrolle.
• Für Immunhistochemie (IHC-P) und Immunfluoreszenz (IF/ICC) ist eine zytoplasmatische Färbung zu erwarten. Optimieren Sie die Antigen-Retrieval- und Permeabilisierungsprotokolle nach Bedarf.
• Bei der Durchführung von ELISA titrieren Sie den Antikörper, um die optimalen Erfassungs-/Nachweisbedingungen zu ermitteln. Dieser Antikörper kann in Kombination mit passendem Antigen oder Nachweisantikörpern im Sandwich-ELISA-Format verwendet werden.
• Angesichts der Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte eignet sich dieser Antikörper für translationswissenschaftliche Studien in diesen Modellorganismen; validieren Sie ihn im entsprechenden Probenystem, um die Spezifität zu bestätigen.

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