Anti-GNRH1 Polyklonale Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P01148

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von GNRH1

• Progonadoliberin-1 (GNRH1) ist ein Vorläuferprotein, das prozessiert wird, um Gonadotropin-Releasing-Hormon 1 (GnRH) herzustellen, ein Schlüsselregulator der reproduktiven Achse.
• GnRH stimuliert die Hypophyse zur Sekretion von Luteinisierungshormon (LH) und Follikelstimulierendem Hormon (FSH), die für die Gonadenfunktion essenziell sind.
• Das Protein wird durch das GNRH1-Gen kodiert, das auch als GNRH, GRH und LHRH bekannt ist und sich auf Chromosom 8 befindet.
• Es wird als Präproprotein mit einem Signalpeptid (Aminosäuren 1-23) synthetisiert; das reife Dekapeptid (Aminosäuren 24-33) wird nach proteolytischer Spaltung freigesetzt.
• Subzellulär wird GNRH1 in den Sekretionsweg geleitet und aus hypothalamischen Neuronen sezerniert.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen die Amidierung des C-Terminus, die Bildung von Pyroglutaminsäure am N-Terminus und die Spaltung an gepaarten basischen Resten.
• Das Molekulargewicht des unverarbeiteten Vorläufers beträgt etwa 10,38 kDa, aber die Prozessierung ergibt kleinere aktive Peptide.
• Mutationen in GNRH1 sind mit hypogonadotropem Hypogonadismus und dem Kallmann-Syndrom verbunden, was seine klinische Bedeutung unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das verwendete Immunogen entspricht den Aminosäuren 24–92, die das reife GnRH-Dekapeptid und flankierende Sequenzen umfassen; daher kann der Antikörper sowohl die Vorläufer- als auch die prozessierte Form erkennen.
• Für den Western Blot beträgt das vorausgesagte Molekulargewicht des vollständigen Vorläufers ~10 kDa; verwenden Sie ein Gel mit hohem Prozentsatz (z. B. 15%) und optimieren Sie die Transferbedingungen, um kleine Peptide zurückzuhalten.
• Der Nachweis des sezernierten reifen Peptids im WB kann eine Konzentration des Kulturüberstands oder Peptidextraktionsprotokolle erfordern.
• Bei IF/ICC wird GNRH1 sezerniert; erwägen Sie die Verwendung von Golgi-Inhibitoren (z. B. Brefeldin A), um die intrazelluläre Akkumulation in neuroendokrinen Zellen sichtbar zu machen.
• Für den ELISA kann der Antikörper als Capture- oder Nachweisreagenz verwendet werden; validieren Sie seine Leistung mit rekombinanten GnRH-Standards.
• Die Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte deutet auf konservierte Epitope hin; überprüfen Sie jedoch immer die Spezifität für die entsprechende Spezies und Gewebeart.

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