Anti-GNAT3-Kaninchen-polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA – A8MTJ3

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von GNAT3

• Das G-Protein-Untereinheitsprotein G(t) Alpha-3, auch als Gustducin-Alpha-3-Kette bekannt, wird vom GNAT3-Gen kodiert und gehört zur Familie der Alpha-Untereinheiten heterotrimerer G-Proteine.
• Es spielt eine zentrale Rolle bei der Transduktion von bitteren, süßen und Umami-Geschmacksreizen, indem es spezifische Geschmacksrezeptoren auf der Zelloberfläche mit einer cGMP-Phosphodiesterase koppelt. Dies führt zu einer Abnahme der intrazellulären cAMP- und cGMP-Spiegel und anschließendem Kalziumeinstrom. Verwandte Referenzen: PMID:38600377 PMID:38776963
• Das Gustducin-Heterotrimer vermittelt Reaktionen auf bittere und süße Verbindungen: Die Alpha-Untereinheit reguliert die Phosphodiesterase-Aktivität, während die Beta-/Gamma-Untereinheiten die Phospholipase C aktivieren, was zu erhöhten Konzentrationen von Inositoltrisphosphat und intrazellulärem Kalzium führt.
• GNAT3 koppelt funktionell an Heterodimere von Geschmacksrezeptoren: TAS1R2/TAS1R3 für die Wahrnehmung von Süße und TAS1R1/TAS1R3 für den Umami-Geschmack sowie an Bitterrezeptoren der T2R-Familie wie TAS2R14. Verwandte Referenzen: PMID:38600377 PMID:38776963
• Im Gastrointestinaltrakt fungiert GNAT3 in enteroendokrinen Zellen als luminaler Zuckersensor. Es kontrolliert die Expression des Na+-Glukose-Transporters SGLT1 und stimuliert die Sekretion der Inkretinhormone GLP-1 und GIP. Dadurch verbindet es die Geschmackssignalübertragung mit der Stoffwechselregulation und der Glukosehomöostase.
• Die subzelluläre Lokalisierung ist zytoplasmatisch. Eine gewebespezifische Expression findet sich in den Geschmacksknospen der Wall- und Blätterpapillen, in enteroendokrinen L-Zellen des Darms sowie in Spermatozoen.
• Das annotierte Molekulargewicht beträgt ungefähr 40 kDa; zu den posttranslationalen Modifikationen gehört die Myristoylierung, die möglicherweise die Membranassoziation erleichtert.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 60–130 von GNAT3 (NP_001095856.1), einer internen Region. Es wird erwartet, dass der resultierende polyklonale Antikörper sowohl natives als auch denaturiertes Protein erkennt und sich für Anwendungen wie WB, IF/ICC und ELISA eignet.
• Beim Western Blot liegt die erwartete Bande bei etwa 40 kDa. Verwenden Sie geeignete Blockierungsbedingungen und eine geeignete Verdünnung des Primärantikörpers, basierend auf den endogenen Expressionsniveaus in Geschmacks- oder Darmgewebe.
• Optimieren Sie bei Immunfluoreszenz/ICC die Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokolle, da GNAT3 ein zytoplasmatisches Protein ist. Fügen Sie geeignete Negativkontrollen und eine Gegenfärbung ein.
• Beachten Sie bei der Durchführung eines ELISA, dass polyklonale Antikörper aufgrund der Bindung an mehrere Epitope ein höheres Signal liefern können. Titrieren Sie den Antikörper und verwenden Sie ein passendes sekundäres Nachweissystem.
• Bestätigen Sie die Kreuzreaktivität mit Maus- und Humanproben und validieren Sie die Leistung in dem von Ihnen untersuchten Gewebe oder der interessierenden Zelllinie.

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