Anti-GM-CSF-Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, ELISA – P48750

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von GM-CSF

• GM-CSF, der bei der Ratte vom Csf2-Gen kodiert wird, wird auch als koloniestimulierender Faktor (CSF) bezeichnet. Er fungiert als sezerniertes Zytokin.
• Die Hauptfunktion von GM-CSF besteht darin, das Wachstum und die Differenzierung hämatopoetischer Vorläuferzellen verschiedener Zelllinien zu stimulieren, darunter Granulozyten, Makrophagen, Eosinophile und Erythrozyten.
• Als Glykoprotein mit einem Signalpeptid und Disulfidbrücken wird GM-CSF als Wachstumsfaktor klassifiziert, der für die Hämatopoese und die Regulation der Immunantwort von zentraler Bedeutung ist.
• GM-CSF wird überwiegend sezerniert und wirkt im extrazellulären Milieu, um seine biologischen Effekte auf Zielzellen auszuüben.
• Das reife Protein hat ein vorhergesagtes Molekulargewicht von etwa 16,5 kDa, wobei die Glykosylierung beim Western Blot zu einer scheinbaren Masse von ungefähr 17 kDa führen kann.
• Zu den strukturellen Merkmalen gehören Disulfidbrücken, die für die korrekte Faltung und biologische Aktivität entscheidend sind und mit seiner Funktion als Zytokin übereinstimmen.
• Zu den mit GM-CSF assoziierten Schlüsselbegriffen gehören Zytokin, Disulfidbrücke, Glykoprotein, Wachstumsfaktor, Referenzproteom, sezerniert und Signal, was seine Funktion und posttranslationalen Modifikationen widerspiegelt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das verwendete Immunogen entspricht den Aminosäuren 20–144 des Ratten-GM-CSF und deckt die reife sezernierte Form ab. Dies deutet darauf hin, dass der Antikörper wahrscheinlich das biologisch aktive, prozessierte Protein erkennt.
• Für den Western Blot sollten reduzierende Bedingungen in Betracht gezogen werden, um Disulfidbrücken zu berücksichtigen. Es wird eine Bande bei etwa 17 kDa erwartet, wobei die Glykosylierung leichte Verschiebungen verursachen kann.
• Für ELISA-Anwendungen kann die Kombination mit einem Detektionsantikörper, der an ein nicht überlappendes Epitop bindet, die Assay-Empfindlichkeit verbessern. Die Validierung sollte in geeigneten Probentypen erfolgen, beispielsweise in Rattenserum oder Zellkulturüberständen.
• Als sezerniertes Protein kann GM-CSF in einigen Proben in niedrigen Konzentrationen vorhanden sein. Zur Verbesserung des Nachweises können Anreicherungs- oder Konzentrationsschritte in Betracht gezogen werden.

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