Anti-GM-CSF monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P01587

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von GM-CSF

• GM-CSF (Granulozyten-Makrophagen-Kolonie-stimulierender Faktor) wird vom Csf2-Gen kodiert und wird auch als Kolonie-stimulierender Faktor (CSF) bezeichnet.
• Es fungiert als Zytokin, das das Wachstum und die Differenzierung von hämatopoetischen Vorläuferzellen verschiedener Linien stimuliert – einschließlich Granulozyten, Makrophagen, Eosinophilen und Erythrozyten.
• Die subzelluläre Lokalisation ist ausschließlich sezerniert, was mit seiner Rolle als extrazelluläres Signalmolekül übereinstimmt.
• Wichtige strukturelle Merkmale sind ein Signalpeptid (das gespalten wird, um die reife Form 18-141 zu erzeugen) sowie das Vorhandensein von Disulfidbindungen und Glykosylierungsstellen, wodurch es als glykoproteiner Wachstumsfaktor klassifiziert wird.
• Laut UniProt-Annotation hat das reife Protein ein berechnetes Molekulargewicht von ~16 kDa, was mit der nachgewiesenen Bandgröße übereinstimmt.
• Zusätzliche Schlüsselwörter heben seine Charakterisierung als Zytokin, Wachstumsfaktor und Mitglied des Referenzproteoms hervor, mit direkter Proteinsequenzierungsnachweis.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die reife sezernierte Form (AS 18-141) von Maus GM-CSF, sodass dieser Antikörper gut geeignet ist, das endogene Protein in Mausproben nachzuweisen.
• Für Western Blot (WB) validieren Sie mit geeigneten Positivkontrollen (z. B. aktivierte T-Zellen oder Makrophagen) und berücksichtigen Sie das vorausgesagte Molekulargewicht von etwa 16 kDa; reduzierende Bedingungen können erforderlich sein.
• Beachten Sie bei der Immunfluoreszenz (IF/ICC) die sezernierte Natur von GM-CSF – optimieren Sie Permeabilisierungs- und Fixierungsprotokolle, um intrazelluläre Färbung zu erfassen, und fügen Sie eine Negativkontrolle hinzu, um spezifisches Signal zu unterscheiden.
• Für ELISA-Anwendungen bewerten Sie die Leistung des Antikörpers in Sandwich- oder indirekten Formaten mit rekombinanten GM-CSF-Standards und ermitteln Sie optimale Beschichtungs- und Nachweis-Konzentrationen empirisch.

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