Anti-Glypican 3 (GPC3) Polyklonaler Antikörper für WB, FC, ELISA - P51654

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Glypican-3

• Glypican-3 (GPC3) ist ein Zelloberflächen-Proteoglykan, das über einen Glycosylphosphatidylinositol (GPI)-Anker an die Membran gebunden ist. Verwandte Referenzen: PMID:14610063
• Es reguliert den Hedgehog-Signalweg negativ, indem es mit dem Rezeptor PTC1 um Hedgehog-Proteine konkurriert und die Endozytose sowie lysosomale Degradation des Komplexes auslöst.
• GPC3 reguliert den kanonischen Wnt-Signalweg positiv, indem es an Frizzled-Rezeptoren bindet und deren Wechselwirkung mit Wnt-Liganden verstärkt. Verwandte Referenzen: PMID:16227623, PMID:24496449
• Es reguliert auch den nicht-kanonischen Wnt-Signalweg positiv und bindet CD81, was die transkriptionelle Repression durch HHEX moduliert.
• GPC3 hemmt die Dipeptidylpeptidase-Aktivität von DPP4. Verwandte Referenzen: PMID:17549790
• Das Protein spielt wesentliche Rollen in der embryonalen Entwicklung, einschließlich der Extremitätenmusterbildung, Skelettentwicklung, renalen Verzweigungsmorphogenese, Bildung der Koronargefäße und Gastrulation.
• GPC3 enthält Heparansulfatketten und unterliegt alternatives Spleißen; es wird als Glykoprotein mit Disulfidbrücken und einer Pyrrolidoncarbonsäure-Modifikation klassifiziert.
• Die Gewebeexpression ist am höchsten in Lunge, Leber und Niere, wobei das Protein in der Plazenta nachgewiesen wurde. Verwandte Referenzen: PMID:32337544

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid innerhalb der C-terminalen Region (aa 481–580), was darauf hindeutet, dass der Antikörper hauptsächlich lineare Epitope erkennt und sich daher gut für den denaturierenden Western Blot (WB) eignet.
• Im WB ist eine Bande nahe 66 kDa für GPC3 zu erwarten; jedoch können Glykosylierung und andere Modifikationen die scheinbare molekulare Masse verschieben. Validieren Sie mit geeigneten positiven Kontrollen.
• Für die Durchflusszytometrie (FC) stellen Sie sicher, dass GPC3 an der Zelloberfläche exprimiert wird, da das Epitop auf intakten Zellen zugänglich sein kann; für die intrazelluläre Detektion ist möglicherweise eine Permeabilisierung erforderlich.
• Der Antikörper kreuzreagiert mit murinem und Ratten-GPC3, was die Verwendung in Nagetiermodellsystemen ermöglicht. Erwägen Sie, die Reaktivität in Ihrem spezifischen experimentellen Kontext zu überprüfen.
• Die ELISA-Leistung kann durch Verwendung des Immunogenpeptids oder rekombinanter GPC3-Fragmente optimiert werden; titrieren Sie die Antikörperkonzentration für das beste Signal-Rausch-Verhältnis.

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