Anti-Glutamin-Synthetase (GLUL) polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P15104

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung der Glutamin-Synthetase (GLUL)

• Glutamin-Synthetase (GS), auch bekannt als Glutamat-Ammoniak-Ligase oder Palmitoyltransferase GLUL (Aliase: GS, GLNS, PIG43, PIG59), ist ein Schlüsselenzym im Stickstoffstoffwechsel, das die ATP-abhängige Umwandlung von Glutamat und Ammoniak in Glutamin katalysiert (PubMed:16267323, PubMed:30158707, PubMed:36289327). Verwandte Referenzen: PMID:16267323 PMID:30158707 PMID:36289327
• Im Gehirn spielt GLUL eine kritische Rolle bei der Entgiftung von Ammoniak und der Umwandlung von neurotoxischem Glutamat in inertes Glutamin, während es in der Leber an der systemischen Ammoniak-Clearance beteiligt ist (Aufgrund von Ähnlichkeit).
• Das Enzym ist essentiell für die Proliferation fetaler Hautfibroblasten (PubMed:18662667) und trägt zur Biogenese der ribosomalen 40S-Untereinheit bei (PubMed:26711351). Verwandte Referenzen: PMID:18662667 PMID:26711351
• GLUL zeigt nicht-kanonische Funktionen: Sie wirkt als Palmitoyltransferase für die GTPase RHOJ, erleichtert deren Membranlokalisierung und Aktivierung, was für die Migration von Endothelzellen und Angiogenese erforderlich ist (PubMed:30158707). Verwandte Referenzen: PMID:30158707
• Durch Interaktion mit BEST2 moduliert GLUL die Kanalaktivität von BEST2: Sie hemmt die Kanalsteuerung in Abwesenheit von intrazellulärem L-Glutamat, sensibilisiert BEST2 jedoch gegenüber Glutamat, was das Öffnen des Kanals fördert (PubMed:36289327). Verwandte Referenzen: PMID:36289327
• Das Enzym lokalisiert sich in mehrere subzelluläre Kompartimente, einschließlich Zytosol, Mikrosomen, Mitochondrien und Zellmembran (UniProt).
• GLUL wird in Endothelzellen exprimiert und durch Acetylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung reguliert; es bindet ATP, Magnesium und Mangan als Kofaktoren (UniProt).
• Während der Erythropoese entgiftet GLUL das durch Porphobilinogen-Desaminase während der Häm-Biosynthese erzeugte Ammonium und verhindert so oxidativen Stress (Aufgrund von Ähnlichkeit).

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Da das rekombinante Immunogen fast die gesamte Länge von GLUL abdeckt, wird erwartet, dass der polyklonale Antikörper sowohl native als auch denaturierte Proteine in verschiedenen Anwendungen nachweist.
• Für den Western Blot (WB) ist eine einzelne Bande bei ca. 42 kDa zu erwarten; erwägen Sie die Verwendung eines positiven Kontrolllysats aus menschlicher, muriner oder rattiger Leber- oder Hirngewebe.
• In der Immunhistochemie (IHC-P) sollten Sie die Antigen-Retrieval-Bedingungen optimieren und mit geeigneten Gewebekontrollen (z. B. menschliche Leberschnitte) validieren, da die Proteinmenge je nach Probentyp variiert.
• Für die Immunfluoreszenz (IF/ICC) können Kolokalisationsstudien mit Markern für Zytosol, Mitochondrien oder Zellmembran aufschlussreich sein, angesichts der vielfältigen subzellulären Lokalisierung des Enzyms.
• Da es sich um ein polyklonales Reagenz handelt, kann die Chargen-zu-Kargen-Konsistenz variieren; Führen Sie eine interne Validierung mit bekannten positiven und negativen Zelllinien durch, um die Spezifität zu bestätigen.

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