Anti-GLUD1/2-Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA – P00367/P49448

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von GLUD1/2

• GLUD1 (Glutamatdehydrogenase 1) ist ein Enzym der mitochondrialen Matrix, das die reversible oxidative Desaminierung von L-Glutamat zu Alpha-Ketoglutarat und Ammoniak unter Verwendung von NAD(P)+ als Cofaktor katalysiert.
• Es spielt eine zentrale Rolle bei der Anaplerose aus Glutamin, indem es Alpha-Ketoglutarat zur Auffüllung von Zwischenprodukten des Tricarbonsäurezyklus produziert. Zugehörige Referenzen: PMID:11032875 PMID:11254391 PMID:16023112
• Das Enzym ist an der Insulinhomöostase beteiligt und reguliert die glukosestimulierte Insulinsekretion in den Betazellen des Pankreas. Zugehörige Referenzen: PMID:11297618 PMID:9571255
• Es kann den Umsatz des erregenden Neurotransmitters Glutamat modulieren und dadurch möglicherweise Lern- und Gedächtnisprozesse beeinflussen.
• GLUD1 befindet sich hauptsächlich in der mitochondrialen Matrix und wurde auch am endoplasmatischen Retikulum nachgewiesen.
• Das Protein unterliegt posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Acetylierung, ADP-Ribosylierung und Phosphorylierung, die seine Aktivität regulieren.
• Dieser Antikörper erkennt sowohl GLUD1 als auch dessen Isoform GLUD2 (auch als GDH2 bezeichnet) aufgrund der hohen Sequenzhomologie zwischen den beiden Proteinen; GLUD2 wird überwiegend in neuralen Geweben und Hodengewebe exprimiert.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Dieser monoklonale Kaninchen-Antikörper wurde gegen ein rekombinantes Protein erzeugt, das die Aminosäuren 319–558 des humanen GLUD1/2 umfasst, eine Region, die in beiden Isoformen konserviert ist. Es wird erwartet, dass er sowohl endogenes GLUD1 als auch GLUD2 nachweist.
• Beim Western Blot sollte in Lysaten aus menschlichen, Maus- und Rattenproben eine Bande bei ungefähr 61 kDa beobachtet werden. Verwenden Sie geeignete Positivkontrollen, beispielsweise Gewebeextrakte aus Leber oder Gehirn.
• Bei der Immunfärbung (IF/ICC, IHC-P) wird eine mitochondriale Lokalisation erwartet. Ein punktförmiges perinukleäres Muster kann sichtbar sein; eine Gegenfärbung mit einem mitochondrialen Marker kann die Bestätigung der Spezifität unterstützen.
• Der Antikörper ist für WB, IF/ICC, IF-P, IHC-P und ELISA geeignet. Optimale Arbeitskonzentrationen und Bedingungen sollten für jeden Assay und Probentyp empirisch bestimmt werden.
• Aufgrund der hohen Ähnlichkeit zwischen GLUD1 und GLUD2 wird eine Kreuzreaktivität mit beiden Zielproteinen erwartet. Dies sollte bei der Interpretation von Ergebnissen aus Geweben berücksichtigt werden, in denen beide Isoformen exprimiert werden.

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