Anti-GLUD1 Poliklonale Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P00367

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von GLUD1

• GLUD1 ist eine mitochondriale Glutamatdehydrogenase, die die Umwandlung von L-Glutamat zu alpha-Ketoglutarat katalysiert und eine zentrale Rolle bei der Glutamin-Anaplerose sowie der Auffüllung von Zwischenprodukten des TCA-Zyklus spielt (PubMed:11032875, PubMed:11254391, PubMed:16023112). Zugehörige Referenzen: PMID:11032875 PMID:11254391 PMID:16023112
• Als Mitglied der Glu/Leu/Phe/Val-Dehydrogenase-Familie bildet GLUD1 ein Homohexamer und verwendet NAD(P)+/NAD(P)H als Kofaktoren; es bindet zudem an ATP und GTP und verbindet so den Energiestatus mit dem Glutamatstoffwechsel.
• GLUD1 ist entscheidend für die Regulation der Insulinsekretion, Mutationen im Gen sind mit dem kongenitalen Hyperinsulinismus-Hyperammonämie-Syndrom verbunden (PubMed:11297618, PubMed:9571255). Zugehörige Referenzen: PMID:11297618 PMID:9571255
• Das Protein lokalisiert überwiegend in der mitochondrialen Matrix, wurde aber auch im endoplasmatischen Retikulum nachgewiesen – ein Hinweis auf zusätzliche Funktionen.
• Die Aktivität von GLUD1 wird durch posttranslationale Modulationen reguliert, darunter Acetylierung, ADP-Ribosylierung und Phosphorylierung, die seine katalytische Effizienz und metabolische Funktion beeinflussen.
• GLUD1 kann durch Beeinflussung der Glutamatspiegel zur Neurotransmission und zu kognitiven Prozessen beitragen (nach Ähnlichkeit).
• Durch alternatives Spleißen entstehen mehrere GLUD1-Isoformen, die seine gewebespezifischen Funktionen potenziell diversifizieren.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Das Immunogen besteht aus einem rekombinanten Fusionsprotein, das die Aminosäuren 54–242 von menschlichem GLUD1 umfasst; überprüfen Sie die Reaktivität des Antikörpers in Ihrem spezifischen Probensystem vor großangelegten Experimenten.
• Für das Western Blotting ist eine Bande bei etwa 61 kDa zu erwarten; optimieren Sie Blockierung und Antikörperverdünnung, um Hintergrundsignale zu minimieren – dies gilt insbesondere für Maus- und Rattenlysate aufgrund der hohen Homologie.
• Bei der Immunhistochemie (paraffineingebettete Schnitte) kann eine Antigen-Demaskierung erforderlich sein; validieren Sie das Färbemuster in bekannten positiven Geweben.
• Für Immunfluoreszenz und Immunpräzipitation verwenden Sie jeweils geeignete Fixierungs-/Permeabilisierungs- sowie Lysepuffer und titrieren Sie die Antikörperkonzentration.
• Der Antikörper ist für ELISA-Anwendungen geeignet; erwägen Sie die Verwendung als Capture- oder Detektionsreagenz nach Bestimmung der Bindungsaffinität.

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