Anti-Glucose-6-Phosphat-Isomerase (GPI)-monoklonaler Antikörper [KD-validiert] für WB, IF/ICC, ELISA - P06744

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung der Glucose-6-Phosphat-Isomerase

• Glucose-6-Phosphat-Isomerase (GPI) ist auch bekannt als autokriner Motilitätsfaktor (AMF), Neuroleukin (NLK), Phosphoglucose-Isomerase (PGI), Phosphohexose-Isomerase (PHI) und Spermienantigen 36 (SA-36).
• Das Enzym katalysiert im Zytoplasma die Umwandlung von alpha-D-Glucose-6-phosphat zu beta-D-Fructose-6-phosphat, den zweiten Schritt der Glykolyse, und die Rückreaktion in der Gluconeogenese. Verwandte Referenzen: PMID:28803808
• GPI zeigt auch C2-Epimerase-Aktivität, die D-Glucose-6-phosphat und D-Mannose-6-phosphat ineinander umwandelt, und Anomerase-Aktivität für mehrere Hexose-6-phosphate.
• Neben ihrer metabolischen Rolle fungiert extrazelluläres GPI als Zytokin: als autokriner Motilitätsfaktor (AMF), ein sezernierter angiogener Faktor, der die Motilität von Endothelzellen fördert. Verwandte Referenzen: PMID:11437381
• Es wirkt auch als Neuroleukin, ein neurotropher Faktor, der das Überleben von spinalen und sensorischen Neuronen unterstützt, und wird von Lektin-stimulierten T-Zellen freigesetzt, um die Immunglobulinsekretion zu induzieren. Verwandte Referenzen: PMID:11004567 PMID:3352745
• Subzellulär findet sich GPI im Zytoplasma und wird sezerniert.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung, Hydroxylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinkonjugation; alternatives Spleißen führt zu mehreren Isoformen.
• Mutationen in GPI sind mit hereditärer hämolytischer Anämie assoziiert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Der Antikörper wurde unter Verwendung eines rekombinanten Immunogens erzeugt, das die Aminosäuren 1-280 des humanen GPI (NP_000166.2) umfasst, was auf konservierte Epitope abzielen kann; die Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte ist bestätigt.
• Für Western Blotting (WB) ist eine Bande bei etwa 63 kDa zu erwarten; ziehen Sie reduzierende Bedingungen und geeignete positive Kontrollen wie humane, murine oder Rattenszelllysate in Betracht.
• Bei Immunfluoreszenz/Immunzytochemie (IF/ICC) beachten Sie, dass GPI zytoplasmatisch und sezerniert ist; für den intrazellulären Nachweis können Fixierung und Permeabilisierung erforderlich sein, und erwägen Sie eine Co-Färbung mit Organellenmarkern.
• Für ELISA kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz verwendet werden; validieren Sie mit rekombinantem GPI-Protein oder biologischen Proben, um Linearität und Sensitivität zu etablieren.
• Als monoklonaler Antikörper ist eine Charge-zu-Charge-Konsistenz zu erwarten, optimieren Sie jedoch stets die Arbeitsverdünnungen für Ihren spezifischen Assay und Probentyp.
• Der Antikörper ist als KD-validiert gekennzeichnet; ziehen Sie die Einbeziehung geeigneter Knockdown-Kontrollen in Ihren Experimenten in Betracht, um die Spezifität zu bestätigen.

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