Anti-GLI1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P08151

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: GLI1-Funktion und -Lokalisierung

• GLI1 wirkt als Schlüssel-Transkriptionsaktivator im Hedgehog-Signalweg und reguliert die kraniofaziale Entwicklung, die Bildung der Zehen sowie die Entwicklung des zentralen Nervensystems und des Gastrointestinaltrakts (PubMed:10806483, PubMed:11238441, PubMed:19706761). Verwandte Referenzen: PMID:10806483 PMID:11238441 PMID:19706761

• Es bindet an die DNA-Konsensussequenz 5'-GACCACCCA-3', um die Expression Zielgen zu regulieren, eine Funktion, die durch die Bindung von Hedgehog-Liganden und Smoothened-Signalisierung aktiviert wird (PubMed:2105456, PubMed:24217340, PubMed:2832761). Verwandte Referenzen: PMID:2105456 PMID:24217340 PMID:2832761

• Im Gegensatz zu GLI2 und GLI3 verfügt GLI1 über keine Repressordomäne und fungiert ausschließlich als Transkriptionsaktivator (PubMed:10075717). Verwandte Referenzen: PMID:10075717

• Zwei Proteinisoformen werden durch alternatives Spleißen gebildet; Isoform 1 ist breit in normalen Geweben exprimiert, während Isoform 2 in diesen Geweben nicht nachweisbar ist und ein anderes Profil zur Aktivierung von Zielgenen aufweist, einschließlich CD24 (PubMed:19706761). Verwandte Referenzen: PMID:19706761

• Die subzelluläre Lokalisierung wird dynamisch reguliert: GLI1 wandert zwischen Zytoplasma und Zellkern und lokalisiert sich auch an primären Zilien, die für die Hedgehog-Signaltransduktion kritisch sind.

• GLI1 ist häufig in Krebsarten (z. B. Gliom, Basalzellkarzinom) überexprimiert und gilt als Proto-Onkogen; seine Aktivität wird durch Phosphorylierung, Acetylierung und Ubiquitinierung reguliert.

• In der normalen Physiologie ist die GLI1-Expression am höchsten in Hoden, Myometrium, Eileiter und spezifischen Hirnregionen wie dem Kleinhirn und dem Risselnakt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das den Aminosäuren 350–450 von humanem GLI1 entspricht (NP_001153517.1); dieser Bereich liegt im zentralen Teil des Proteins und kann für den Nachweis beider Isoformen geeignet sein, eine isoformspezifische Validierung wird jedoch empfohlen.
• Dieser polyklonale Antikörper eignet sich für Western Blot (Zielbande ~118 kDa), Immunhistochemie (Paraffin), Immunfluoreszenz/ICC und ELISA. Optimieren Sie die Antikörperverdünnung und die Blockierungsbedingungen für Ihren spezifischen Probentyp und Assay-Format.
• Für IHC-P sollten Sie Antigen-Retrieval-Methoden (z. B. hitzeinduziertes Epitop-Retrieval in Citratpuffer) in Betracht ziehen und geeignete positive Kontrollen wie humane Krebsgewebeschnitte einschließen, von denen bekannt ist, dass sie GLI1 überexprimieren.
• Eine Kreuzreaktivität mit Maus- und Rattenproben wurde beobachtet; die Sequenzhomologie deutet auf eine mögliche Detektion in diesen Spezies hin, es wird jedoch eine bestätigende Testung empfohlen.

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