Anti-GIF/Intrinsic Factor Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P27352

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: GIF (Intrinsic Factor) Funktion und Lokalisation

• GIF kodiert für das Cobalamin-bindende Intrinsic Factor, auch bekannt als gastrisches Intrinsic Factor (IF) oder INF. Es handelt sich um ein sezerniertes Glykoprotein mit einem Molekulargewicht von etwa 45 kDa (UniProt: 45.416 Da).
• Seine Hauptfunktion besteht darin, die Absorption von Vitamin B12 (Cobalamin) im Ileum zu fördern, indem es einen Komplex mit Cobalamin bildet und mit dem Cubilin-Rezeptor (CUBN) für die rezeptorvermittelte Endozytose interagiert.
• Die Expression ist hochspezifisch für die Magenschleimhaut, wo sie von den Parietalzellen sezerniert wird.
• Das Protein weist Merkmale wie ein Signalpeptid, Disulfidbrücken und Glykosylierungsstellen auf und unterliegt alternativem Spleißen und Phosphorylierung (UniProt-Keywords).
• Gehört zur Familie der Cobalamin-Transporter und ist am Kobaltionentransport beteiligt. Mutationen in GIF sind mit einem angeborenen Intrinsic-Factor-Mangel assoziiert, einer seltenen Form der megaloblastären Anämie.
• Dreidimensionale Strukturstudien wurden berichtet (UniProt-Keyword: 3D-Struktur).

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 20–300 des humanen GIF und deckt die N-terminale Region einschließlich der Signalpeptid-Spaltstelle und der Cobalamin-Bindungsdomäne ab. Diese Region ist relativ konserviert, was die Kreuzreaktivität mit der Maus (wie angegeben) unterstützt.
• Für den Western Blot (WB) ist in Magengewebe-Lysaten oder Zelllinien, die GIF exprimieren, eine Bande bei etwa 45 kDa zu erwarten. Validieren Sie den Antikörper im geeigneten Proben-System, da die Sekretion zu niedrigen intrazellulären Spiegeln führen kann.
• Für die Immunfluoreszenz/Immunzytochemie (IF/ICC) sollte eine Permeabilisierung in Betracht gezogen werden, um intrazelluläre Proteinpools während der Synthese nachzuweisen. Für den Nachweis des sezernierten Proteins kann die Zugabe eines Sekretionshemmers (z. B. Brefeldin A) das Signal verstärken.
• Bei ELISA-Anwendungen kann dieser polyklonale Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz verwendet werden; die Paarung mit einem monoklonalen Antikörper kann jedoch die Spezifität in Sandwich-ELISA-Formaten verbessern.
• Fügen Sie stets geeignete positive (Magenschleimhautextrakt) und negative (nicht-exprimierendes Gewebe) Kontrollen ein und validieren Sie die Leistung des Antikörpers in Ihrem experimentellen Kontext.

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