Anti-GFRA3 Kaninchen-polyclonaler Antikörper für WB und ELISA - O60609

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von GFRA3

• GFRA3 (GDNF-Familienrezeptor Alpha-3) ist ein Glykosylphosphatidylinositol (GPI)-verankerter Oberflächenrezeptor, der zur GDNF-Rezeptorfamilie gehört.
• Es fungiert als hochaffiner Rezeptor für Artemin (ARTN), einen Neurotrophin-Faktor, der das Überleben von sensorischen und sympathischen peripheren Neuronen unterstützt. Verwandte Referenzen: PMID:31535977 PMID:9883723
• Nach der Bindung von Artemin bildet GFRA3 einen Komplex mit der RET-Rezeptor-Tyrosinkinase, was zur Autophosphorylierung und Aktivierung von RET-vermittelten nachgeschalteten Signalwegen führt.
• Der Rezeptor ist über eine GPI-Verankerung an der äußeren Schicht der Zellmembran befestigt und verfügt über ein Signalpeptid, mehrere Disulfidbindungen und N-verknüpfte Glykosylierungsstellen.
• GFRA3 ist weit verbreitet in erwachsenen und fötalen Geweben exprimiert, mit besonders hohen Gehalten im peripheren Nervensystem (sensorische und sympathische Ganglien), Magen und Appendix; im Zentralnervensystem fehlt die Expression.
• Durch alternatives Spleißen des GFRA3-Gens können mehrere Isoformen entstehen, und das Protein unterliegt einer proteolytischen Abspaltung von der Membran.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 32–240 von humanem GFRA3, das die extrazelluläre Ligandenbindungsdomäne umfasst; dieses Design begünstigt die Detektion der membrangebundenen oder abgespaltenen Formen.
• Verwenden Sie für Western Blotting geeignete Lysepuffer mit Detergenzien und Proteaseinhibitoren; das vorhergesagte Molekulargewicht beträgt ~45 kDa, aber Glykosylierung kann zu einer Verschiebung zu höheren scheinbaren Massen führen.
• Betrachten Sie bei ELISA die Beschichtung mit der extrazellulären Domäne von rekombinantem GFRA3 oder Artemin, um den Antikörper zu binden; bestätigen Sie die Reaktivität gegen das native Protein in biologischen Matrizen.
• Aufgrund der polyklonalen Natur sollte eine potenzielle Kreuzreaktivität mit anderen GDNF-Familienrezeptoren (z. B. GFRA1, GFRA2) mittels Knockout-Kontrollen oder blockierenden Peptiden überprüft werden.
• Die nachgewiesene Kreuzreaktivität mit Maus-GFRA3 ermöglicht vergleichende Studien zwischen Spezies; validieren Sie die Leistung in der relevanten Probenart vor quantitativen Vergleichen.

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