Monoklonaler Anti-GFAP-Antikörper für WB, IF, IHC-P, ELISA – P14136

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von GFAP

• GFAP (Glial fibrillary acidic protein, saures Gliafaserprotein) ist ein Intermediärfilamentprotein der Klasse III und ein etablierter Marker für Astrozyten im zentralen Nervensystem.
• Es spielt eine entscheidende Rolle bei der Unterscheidung von Astrozyten und anderen Gliazellen während der Entwicklung des ZNS (UniProt).
• Das Protein ist überwiegend im Zytoplasma lokalisiert, wo es filamentöse Netzwerke bildet.
• GFAP zeigt eine gewebespezifische Expression in Zellen, denen Fibronektin fehlt, was mit seiner Spezifität für Gliazellen übereinstimmt.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören Citrullinierung, Methylierung und Phosphorylierung, die möglicherweise die Filamentdynamik und -funktion regulieren.
• Das GFAP-Gen unterliegt alternativem Spleißen, wodurch mehrere Isoformen mit potenziell unterschiedlicher Funktion entstehen.
• Mutationen in GFAP stehen mit der Alexander-Krankheit, einer Leukodystrophie, in Verbindung und unterstreichen damit seine Bedeutung für die Integrität von Astrozyten.
• Zu den UniProt-Schlüsselwörtern gehören: 3D-Struktur, Coiled-Coil, direkte Proteinsequenzierung, Proteomik-Identifizierung, Referenzproteom.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das zur Herstellung dieses Antikörpers verwendete Immunogen entspricht den Aminosäuren 60–383 des humanen GFAP und deckt einen großen internen Bereich des Proteins ab. Dieses Design kann die Erkennung mehrerer GFAP-Isoformen sowie die Speziesübergreifende Reaktivität ermöglichen, die für Maus und Ratte validiert wurde.
• Beim Western Blotting (WB) wird eine Bande bei etwa 50 kDa erwartet (theoretisches Molekulargewicht ~49,9 kDa). Es empfiehlt sich, Gesamtzelllysate aus Hirngewebe oder kultivierten Astrozyten zu verwenden.
• Für Immunfluoreszenz (IF/ICC, IF-P) und Immunhistochemie (IHC-P) sollten die Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen optimiert werden, um die Struktur der Intermediärfilamente zu erhalten. Die GFAP-Färbung sollte in Astrozyten ein typisches filamentöses zytoplasmatisches Muster zeigen.
• Bei ELISA-Anwendungen kann dieser Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz eingesetzt werden; die Kombination mit einem geeigneten passenden Antikörper kann die Sensitivität erhöhen.
• Aufgrund des monoklonalen Charakters ist eine hohe Chargenkonsistenz zu erwarten. Dennoch wird eine Validierung unter den spezifischen experimentellen Bedingungen empfohlen.

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