Anti-GCN2 Kaninchen-Polyclonalantikörper für WB, IF/ICC, ELISA – Q9P2K8

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von GCN2

• GCN2, kodiert von EIF2AK4, ist eine metabolisch-stressempfindliche Serin/Threonin-Proteinkinase, die eIF-2-Alpha als Reaktion auf geringe Aminosäureverfügbarkeit phosphoryliert und die integrierte Stressantwort (ISR) aktiviert. Verwandte Referenzen: PMID:25329545 PMID:32610081
• Die Phosphorylierung von eIF-2-Alpha wandelt es in einen globalen Translationsinhibitor um, der die cap-abhängige Proteinsynthese abschwächt, gleichzeitig die selektive Translation von ISR-spezifischen mRNAs wie ATF4 ermöglicht und dadurch die Expression von Genen für die Aminosäurebiosynthese neu programmiert. Verwandte Referenzen: PMID:32610081
• Das Protein ist an der Zellzyklusregulation beteiligt, indem es die Translationsrepression der Cyclin-D1-mRNA nach UPR-Aktivierung oder die Translationsaktivierung von CDKN1A/p21 bei Aminosäuremangel fördert. Verwandte Referenzen: PMID:26102367
• GCN2 enthält eine ATP-Bindedomäne, eine Kinasedomäne und eine tRNA-Bindedomäne, wodurch es ungeladene tRNAs direkt erkennen und den Nährstoffstatus mit der Translationskontrolle verbinden kann.
• Es lokalisiert hauptsächlich im Zytoplasma und ist weit verbreitet exprimiert, mit einer bemerkenswerten Präsenz in Lunge, glatten Muskelzellen und Makrophagen.
• Die Kinase spielt je nach Stresskontext eine pro-survival und proapoptotische Rolle und ist zudem an der antiviralen Abwehr beteiligt, wo sie Autophagie und Antigenpräsentation während der Infektion mit dem Gelbfiebervirus fördert. Verwandte Referenzen: PMID:24310610
• Durch alternatives Spleißen entstehen mehrere Isoformen, und das Protein unterliegt posttranslationalen Modifikationen einschließlich Acetylierung und Phosphorylierung, die seine Aktivität regulieren.
• Über die Nährstofferkennung hinaus trägt GCN2 im neuronalen Kontext zu synaptischer Plastizität, Lernen, der Bildung von Langzeitgedächtnis und der Hemmung des Neuritenwachstums bei.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Verwenden Sie für WB eine SDS-PAGE mit niedrigem Prozentsatz (z. B. 6–8%), um das hochmolekulare GCN2-Protein (~187 kDa) aufzutrennen, und optimieren Sie die Transferbedingungen für große Proteine.
• Erwarten Sie bei IF/ICC eine überwiegend zytoplasmatische Färbung; validieren Sie die subzelluläre Lokalisation mit Organellenmarkern in Ihrem verwendeten Zellsystem.
• Das Immunogen entspricht der N-terminalen Region (AS 1–300); überprüfen Sie die Spezifität bei den relevanten Spezies (Mensch, Maus, Ratte) mit positiven und negativen Kontrollen.
• Verwenden Sie passende Ladekontrollen und erwägen Sie die Zugabe von Protease-/Phosphatase-Inhibitoren während der Lyse, da posttranslationale Modifikationen die Proteinwanderung beeinflussen können.

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