Anti-GCDH Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - Q92947

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: GCDH-Funktion und -Lokalisierung

• Das GCDH (Glutaryl-CoA-Dehydrogenase)-Protein, auch bekannt als GCD oder ACAD5, katalysiert die oxidative Decarboxylierung von Glutaryl-CoA zu Crotonyl-CoA und CO₂ in der mitochondrialen Matrix. Diese Reaktion ist ein Schlüsselschritt im Abbau von L-Lysin, L-Hydroxylysin und L-Tryptophan.
• Als Mitglied der Acyl-CoA-Dehydrogenase-Familie verwendet GCDH Elektronentransferflavoprotein (ETF) als Elektronenakzeptor, und seine Aktivität ist für einen korrekten Aminosäurenkatabolismus essentiell.
• Die durch alternatives Spleißen erzeugte kurze Isoform von GCDH ist katalytisch inaktiv, was auf regulatorische Komplexität hindeutet. Sowohl lange als auch kurze Isoformen werden in Fibroblasten und Leber exprimiert.
• GCDH ist in der mitochondrialen Matrix lokalisiert, was mit seiner Rolle in Fettsäure- und Aminosäureoxidationswegen übereinstimmt.
• Das Protein ist ein Flavoprotein, das FAD als Cofaktor bindet. Sein Mangel verursacht Glutarazidurie Typ I, eine schwere Stoffwechselstörung, die durch neurologische Schäden und organische Säureakkumulation gekennzeichnet ist.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung, die seine Aktivität oder Stabilität modulieren kann.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das verwendete Immunogen ist ein rekombinantes Fusionsprotein, das die Aminosäuren 149-438 des humanen GCDH (NP_000150.1) umfasst. Diese Region deckt einen Teil der katalytischen Domäne ab und erzeugt wahrscheinlich Antikörper, die sowohl lange als auch kurze Isoformen erkennen, sofern das Epitop in beiden vorhanden ist.
• Für den Western Blot ist basierend auf dem vorhergesagten Molekulargewicht eine Bande um 48 kDa zu erwarten; die beobachtete Mobilität kann jedoch aufgrund posttranslationaler Modifikationen oder Isoformunterschiede variieren. Validieren Sie das Molekulargewicht anhand bekannter Kontrollen in Ihrem Probensystem.
• Dem Antikörper wird eine Reaktivität mit humanen, murinen und ratten Proben nachgesagt. Für andere Spezies sollte die Sequenzhomologie vor der Verwendung überprüft und die Kreuzreaktivität experimentell verifiziert werden.
• Bei der Durchführung von IHC-P sollten die Antigen-Retrieval-Bedingungen (z.B. Citratpuffer pH 6.0 oder EDTA-Puffer pH 9.0) und Antikörperverdünnungen für den untersuchten Gewebetyp und die Fixierungsmethode optimiert werden.
• Als polyklonaler Antikörper sollte eine mögliche Charge-zu-Charge-Variabilität berücksichtigt werden; jede neue Charge kann eine Neuoptimierung der Assay-Bedingungen erfordern.

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