Anti-GCAT Kaninchen-Polyclonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O75600

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von GCAT

• GCAT kodiert das mitochondriale Enzym 2-Amino-3-Ketobutyrat-Coenzym A-Ligase, auch bekannt als Aminoacetonsynthase oder Glycinacetyltransferase.
• Diese Pyridoxalphosphat (PLP)-abhängige Transferase katalysiert die Spaltung von 2-Amino-3-oxobutanoat zu Glycin und Acetyl-CoA, ein Schlüsselschritt beim Threoninabbau und der Glycinbiosynthese.
• GCAT ist überwiegend im Mitochondrium lokalisiert, wurde aber auch im Kern nachgewiesen.
• Das Protein wird stark in Herz, Gehirn, Leber und Bauchspeicheldrüse exprimiert, zusätzlich ist es in der Lunge vorhanden.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen die Acetylierung, alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen.
• UniProt-Schlüsselwörter heben Rollen bei der Acyltransferaseaktivität, der PLP-abhängigen Katalyse und dem mitochondrialen Proteinimport über ein Transitpeptid hervor.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Das Immunogen deckt die Aminosäuren 170-419 des menschlichen GCAT ab und umfasst einen großen Teil des Proteins; daher kann der Antikörper mehrere Isoformen erkennen.
• Bei der Western Blotting ist eine Bande entsprechend dem vorhergesagten Molekulargewicht von ca. 45 kDa zu erwarten; überprüfen Sie die Abwesenheit bei Knockout-Kontrollen, falls verfügbar.
• Bei der IHC-P ist eine positive Färbung in Geweben mit hoher Expression wie Herz, Leber, Gehirn und Bauchspeicheldrüse zu erwarten; verwenden Sie das Auslassen des primären Antikörpers als Negativkontrolle.
• Bei der Verwendung für IF/ICC deutet die mitochondriale Lokalisation darauf hin, dass eine milde Permeabilisierung ausreichen kann; eine Doppelfärbung mit mitochondrialen Markern wird jedoch zur Bestätigung der Spezifität empfohlen.
• Für ELISA-Anwendungen kann das rekombinante Immunogen oder das gereinigte Zielprotein als Beschichtungsantigen dienen; eine empirische Optimierung von Beschichtungskonzentration und Blockierungsbedingungen wird empfohlen.

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