Anti-GATA3-Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, IF, FC – P23771

Wichtige Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von GATA-3

• GATA3 (GATA-bindender Faktor 3) ist ein Mitglied der GATA-Familie von Zinkfinger-Transkriptionsfaktoren, die an die Konsensus-DNA-Sequenz 5'-AGATAG-3' in den regulatorischen Regionen von Zielgenen bindet.
• Es fungiert als Transkriptionsaktivator, der für die Expression der T-Zell-Rezeptor-α- und -δ-Gene entscheidend ist, und ist für die Differenzierung von T-Helfer-2-Zellen (Th2) unerlässlich, wodurch Immun- und Entzündungsreaktionen gesteuert werden.
• GATA3 reguliert die ASB2-Expression durch Ähnlichkeit hoch und koordiniert die IL33-abhängige transkriptionelle Aktivierung von Makrophagen sowie die UCP2-vermittelte metabolische Umprogrammierung, wodurch die alternative Aktivierung von Makrophagen während einer Gewebeschädigung gefördert wird.
• Das Protein ist ausschließlich im Zellkern lokalisiert, was mit seiner Funktion als Transkriptionsfaktor übereinstimmt.
• Es wird überwiegend in T-Zellen und Endothelzellen exprimiert, und Mutationen in GATA3 verursachen Hypoparathyreoidismus, sensorineurale Taubheit und Nierenerkrankungen (HDR-Syndrom) – was sich in den Aliasen HDR/HDRS widerspiegelt.
• GATA3 wird posttranslational phosphoryliert und enthält zwei Zinkfingerdomänen vom Typ C2H2, die die DNA-Bindung vermitteln.
• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen, und das Protein wird in verschiedenen Studien mittels Proteomik identifiziert.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 1–200 des humanen GATA3, eine N-terminale Region, die regulatorische Domänen enthält; daher kann der Antikörper mehrere Isoformen und Phosphorylierungszustände erkennen. Bestätigen Sie dies durch Western Blot mit Lysaten aus GATA3-exprimierenden Zellen.
• Beim Western Blot wird eine Bande von etwa 48 kDa erwartet; verwenden Sie eine geeignete Ladekontrolle und validieren Sie die Signalspezifität durch siRNA-Knockdown oder Knockout-Zelllinien.
• Bei Immunfluoreszenz/Immunzytochemie und Durchflusszytometrie (intrazellulär) sollte eine Kernfärbung beobachtet werden. Permeabilisieren Sie die Zellen angemessen und schließen Sie Isotypkontrollen ein.
• Der Antikörper ist spezifisch für humanes GATA3; eine Kreuzreaktivität mit Maus oder Ratte wurde nicht bestimmt. Validieren Sie ihn in relevanten Modellsystemen, falls eine Spezies-übergreifende Anwendung vorgesehen ist.
• Für ELISA-Anwendungen kann der Antikörper in Sandwich- oder Direktformaten eingesetzt werden; optimieren Sie die Beschichtungs- und Detektionsbedingungen.

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