Anti-GATA3 polyklonaler Antikörper für WB und ELISA - P23771

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von GATA3

• GATA3 (GATA-bindender Faktor 3) ist ein Zinkfinger-Transkriptionsfaktor der GATA-Familie, der durch zwei C4-Typ-Zinkfingermotive gekennzeichnet ist, die die DNA-Bindung an die Konsensussequenz 5'-AGATAG-3' vermitteln.
• Es wirkt als transkriptioneller Aktivator, der für die Expression der T-Zell-Rezeptor-Alpha- und -Delta-Gene essenziell ist und unverzichtbar für die Differenzierung von T-Helfer-2-(Th2-)Zellen bei Immun- und Entzündungsreaktionen.
• GATA3 reguliert die ASB2-Expression positiv (durch Ähnlichkeit) und koordiniert die IL33-getriebene transkriptionelle Aktivierung von Makrophagen, einschließlich der UCP2-abhängigen metabolischen Neuprogrammierung zu einem entzündungshemmenden Phänotyp.
• Als Reaktion auf Gewebeverletzung wirkt GATA3 downstream der IL33-Signalisierung, um die Differenzierung alternativ aktivierter Makrophagen zu fördern und so zur Entzündungsauflösung beizutragen.
• Das Protein lokalisiert im Zellkern, was mit seiner Rolle als Transkriptionsfaktor übereinstimmt, und wird hauptsächlich in T-Zellen und Endothelzellen exprimiert.
• Durch alternatives Spleißen entstehen mehrere Isoformen; die kanonische Isoform hat ein Molekulargewicht von etwa 48 kDa (berechnet aus Uniprot: 47916 Da).
• Posttranslationelle Modifikationen umfassen Phosphorylierung, und Mutationen in GATA3 sind mit Taubheit und anderen Krankheiten (HDR-Syndrom) verbunden.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die N-terminalen 260 Aminosäuren von menschlichem GATA3, eine Region, die Transaktivierungsdomänen und einen Teil des ersten Zinkfingers enthält. Dieses Design kann die Detektion sowohl von Volllängs- als auch von bestimmten verkürzten Isoformen begünstigen.
• Für Western Blot werden Kernextrakte oder Ganzzelllysate aus T-Zelllinien oder IL33-stimulierten Makrophagen empfohlen; eine Bande nahe 48 kDa ist zu erwarten.
• Der Antikörper kreuzreagiert mit murinem GATA3, was die Verwendung in Mausmodellen ermöglicht, dennoch wird eine Validierung im spezifischen Probensystem (z. B. Gewebetyp, Stimulationsbedingungen) empfohlen.
• Bei ELISA-Anwendungen sollten Sie rekombinantes GATA3-Protein oder Peptidfragmente als Capture-Standards verwenden und die Blockierung optimieren, um den Hintergrund durch Kernproteine zu reduzieren.
• Aufgrund der polyklonalen Natur sollte die Charge-zu-Charge-Konsistenz überwacht werden, und kritische Experimente können von der Zugabe eines Kontroll-Knockdown- oder Knockout-Lysats profitieren.

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